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荧光增敏法测定咽炎片中丹皮酚的含量*

2014-06-13

关键词:实验

(泰山医学院化工学院,山东 泰安 271016)

咽炎片由玄参、百部、天冬、牡丹皮等12味药组成,具有养阴润肺、清热解毒、清利咽喉、镇咳止痒的功效,丹皮酚为主药牡丹皮的有效成分,是一种小分子的酚类化合物,呈白色针状结晶,其化学名称为2-羟基-4-甲氧基苯乙酮,具有良好的解热、镇痛、抗菌和抗炎作用[1]。目前检测丹皮酚的方法有紫外分光光度法[2]、高效液相色谱法[3-5]、气相色谱法[6]、电化学方法[7]等。为有效地控制制剂质量,本实验基于AlCl3试剂对丹皮酚具有荧光增敏作用,建立了丹皮酚含量测定的荧光分析法,并成功用于咽炎片中丹皮酚含量的测定。该方法操作简便、灵敏度高、重现性好、结果准确, 适合作为该品种的测定方法。

1 试验部分

1.1 仪器与试剂

RF-5301荧光分光光度计(日本岛津); UV-5300紫外分光光度计;FC204型电子天平;pHS23C型酸度计。

丹皮酚溶液:称取0.0033 g丹皮酚标准品(中国药品生物制品检定所,批号110708-200505),用少量甲醇溶解后转移至100 ml容量瓶中,定容,吸取1.00 ml至100 ml容量瓶中,定容,配成0.33 μg/ml的溶液,吸取1.00 ml至100 ml容量瓶中,定容,配成3.3×10-3μg/ml的溶液;AlCl3溶液:称取6.60 g AlCl3(分析纯),置于小烧杯中,加适量水溶解后转移至100 ml容量瓶中,定容,配成0.50 mol/L的标准溶液;磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液:分别配成0.2 mol/L的磷酸氢二钠溶液和0.3 mol/L的磷酸二氢钠溶液,按不同的比例配成pH 5.8~8.0的一系列缓冲溶液。

试验用水均为二次蒸馏水。

1.2 试验方法

于10 ml比色管中,依次加入0.50 mol/L AlCl3溶液1.00 ml,适量的丹皮酚溶液, 1.00 ml pH 7.0磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液,用二次水定容至10 ml。室温放置5 min,于λem= 455 nm处测定其与试剂空白的荧光强度(λex= 295 nm)。……

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