二阶导数示波极谱检测人血清中NO2-含量方法的建立*
2014-06-13王登奎张丽萍张永梅张桂莲
杨 静 吴 刚 王登奎 张丽萍 张永梅 张桂莲
(1.包头医学院基础学院, 2.包头医学院药学院,3.包头医学院公共卫生学院,内蒙古 包头 014060,4.包头医学院第一附属医院检验科,内蒙古 包头 014010)
体内NO的产生和释放异常可能与多种疾病的发生、发展有关,如急性肺损伤、缺血缺氧性脑损伤等[1-2],现在的研究大多以测定体液和组织中NO的代谢产物亚硝酸根(NO2-)含量来反映体液和组织中NO含量。目前较多的是采用测定灵敏度较高的偶氮染料比色法测定血清中NO2-和NO3-总量以间接测定NO的含量[3-5],但偶氮染料比色法主要应用的试剂为α-萘胺,长期使用会造成环境的污染。目前有国内学者利用二阶导数极谱仪进行了对磺胺和盐酸萘乙二胺反应体系测定血清中亚硝酸根的研究工作[6],但使用的是萘胺类试剂。而利用氨基苯磺酸和8-羟基喹啉为测定体系,采用示波极谱用于检测蔬菜中亚硝酸盐已见报道[7],但尚未见用于人血清NO2-含量测定的报道。
1 材料与方法
1.1仪器 JP-303型极谱分析仪(成都仪器厂)。
1.2实验对象 实验用正常人血清标本均为包头医学院第一附属医院检验科及内蒙古医院检验科2007年2月至5月体检正常成人血清(年龄30~50岁)。所有血清均-20℃冻存待测。
1.3试剂 NO2-标准溶液:用NaNO2配制成浓度为1.0 mg·ml-1的储备液,4℃保存,使用时稀释成浓度为1.0 μg·ml-1的应用液;0.1 mol·L-1HCl溶液;8.0 g·L-1对氨基苯磺酸溶液(对氨基苯磺酸2.0 g加水100 ml加热溶解再加入25 ml 1.0 mol·L-1HCl,定容至250 ml);8-羟基喹啉1.0 g·L-1(8-羟基喹啉250 mg,加2.0 ml 1.0 mol·L-1HCl和3.0 ml乙醇溶解,定容至250 ml);饱和EDTA·2Na溶液;5%氨水溶液。试剂均为分析纯,为北京化学试剂厂生产。……
