李 莉 王玉波 陈岱韻 李俊福

(1.青岛市口腔医院，山东 青岛 266001；2.泰山医学院附属医院口腔科，山东 泰安 271000)

变形链球菌致龋是在牙面的粘附和集聚[1]，利用碳水化合物代谢产酸，酸性产物作用于牙体硬组织造成脱矿，导致龋病的发生[2]。因此,控制致龋细菌粘附在牙面,是预防龋病的有效的措施之一。甜茶含氨基酸、维生素C 以及矿物质等,对阴虚燥咳、咽干口燥、咽喉炎症，糖尿病、肥胖症、高血压等，均有辅助治疗作用[3]，甜茶素有高甜度，可以作为糖替代品。

1 材料和方法

1.1变形链球菌(Streptococcus Mutans)国际标准株ATCC25175(由上海交通大学医学院中心实验室购买)。

1.2甜茶提取物—甜茶皂甙(本课题组提供)。

1.3厌氧培养箱BACTRON 1.5(美国SHELLAB公司)、紫外可见分光光度计(LAMBE DA BIO 20(美国PE公司)、台式离心机5415D(德国EPPENDOR公司)。

1.4MSB 选择培养基(Mitis-Salivaris-Bacitracin Agar)(轻唾琼脂培养基)：胰蛋白胨10 g，示蛋白胨10 g，蔗糖200 g，葡萄糖1 g，无水磷酸氢二钾4 g，琼脂粉20 g，加入1000 ml 蒸馏水中溶解，调pH 至7.6，再加入 0.2%曲利苯蓝 3.5 ml，0.1%结晶紫 0.8 ml, 于15 Ib/in2、110 ℃ 下高压灭菌15 min，冷却至55 ℃ 左右，加入0.1% 亚碲酸钾2.8 ml，200 unit/ml杆菌肽1ml。

1.5基础培养液配制[4]：胰蛋白胨20 g，氯化钠2 g，蔗糖50 g，三水磷酸氢二钾3.92 g，无水磷酸二氢钾2 g，碳酸钾1 g ,硫酸镁0.12 g，硫酸锰0.15 g, 适量酵母浸汁、半胱氨酸，加蒸馏水1000ml，调pH=7.4， 121 ℃，8磅15 min高压灭菌。

1.6变形链球菌ATCC25175活化后接种于 MSB固体培养基上，厌氧培养48 h，涂片检查为纯培养后，取典型菌落，于无菌生理盐水内制成混悬液，紫外可见光比浊仪调麦氏值=0.5，此时细菌浓度为108CFU/ml(参照仪器使用说明)。

1.7实验组：配制浓度为5 g/100 ml的过饱和甜茶皂甙混悬液，用基础培养液进行液体二倍稀释法稀释[5]，得到浓度依次为5 g/100 ml、2.5 g/100 ml、1.25 g/100 ml、 0.625 g/100 ml、0.313 g/100 ml、0.156 g/100 ml的10 ml溶液。……