丁忠家 唐晓旭 陈鑫 宋勇莉 米文娟 王剑 陈福权 邱建华

现阶段细胞凋亡机制，主要以线粒体为中心，包括半胱氨酸天冬氨酸(caspase)途径及caspase非依赖途径。凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor，AIF)在caspase非依赖途径的细胞凋亡中起关键作用[1]。AIF 凋亡途径是一种caspase非依赖凋亡途径，也是现阶段以线粒体为中心的细胞凋亡中的重要途径[2]，多发生于神经细胞、特殊类型肿瘤细胞等[3]。AIF作为氧化传递链中一种重要的黄素蛋白，广泛分布于线粒体内膜，成为AIF途径凋亡的发生基础[4]。

螺旋神经元细胞(spiral garglion neurons，SGNs)是耳蜗中重要的感觉细胞，在声信号转换及传导中起重要作用。螺旋神经元的损伤、凋亡，可以直接引起听力减退，内毛细胞向听觉中枢信号传递障碍，甚至可能导致听神经病的发生[5]。螺旋神经元损伤、凋亡过程中，兴奋性神经递质谷氨酸(Glu)发挥着重要作用，是噪声性聋、年龄相关性聋、部分难治性聋等感音神经性聋的重要病因[6]。然而，谷氨酸毒性损伤是否与AIF凋亡因子相关以及是否参与耳聋的发生，仍有待进一步研究。本实验采用体外培养螺旋神经元的方法，观察不同浓度谷氨酸损伤条件下，螺旋神经元中AIF的表达与分布状况，探讨谷氨酸促螺旋神经元凋亡的机制。

1 材料与方法

1.1实验动物及分组 选用40只出生后0～3天SD大鼠螺旋神经元行体外培养，动物由第四军医大学实验动物中心提供，平均分为4组，分别为正常组：仅给予正常SGNs培养液培养；10 mM Glu组：按1:7分别加入80 mM谷氨酸液及SGNs培养液培养；20 mM Glu组：按1:3分别加入80 mM谷氨酸液及SGNs培养液培养；……