腹泻症候群致泻性大肠埃希氏菌血清型及毒力基因检测
2014-06-07慕毅敏蔡旭明周敬纲蔡旭辉
慕毅敏 蔡旭明 周敬纲 蔡旭辉
致泻性大肠埃希菌生存与人和动物的肠道中,随粪便排出而污染水源、土壤、食品、器具等,人群对致泻大肠埃希菌普遍易感,根据其致病机制,致泻大肠埃希菌至少可分为5个类型:肠产毒素大肠埃希菌(ETEC)、肠致病性大肠埃希菌(EPEC)、肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)、肠出血性大肠埃希菌(EHEC)、肠集聚性黏附性大肠埃希菌(EAEC)。其中,ETEC是发展中国家婴幼儿及旅游者腹泻的主要病原,EPEC是婴儿腹泻的主要病原,EIEC主要引起较大儿童和成人腹泻[1-2]。为了全面了解本地区腹泻症候群中致泻大肠埃希菌的感染情况,查清致泻大肠埃希菌的血清群、型分布规律以及所携带毒力基因[3-6],为腹泻病的防治对策提供科学依据[7-8],现将2012-2013年本地区腹泻症候群中致泻大肠埃希菌的监测检验情况报告如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源 本地区2012-2013年腹泻症候群监测医院门诊未使用过抗生素腹泻患者的稀便、水样便、黏脓便或脓血便等。标本总计719份,其中7岁以下婴幼儿618份,7岁以上儿童及成人101份。
1.2 标本的分离程序
1.2.1 分离 用无菌拭子采集少量粪便直接接种麦康凯(MAC)琼脂平板和O157显色平板上,温度(36±1)℃,培养18~24 h。
1.2.2 增菌 用无菌拭子采集少量粪便接种mEC肉汤增菌液,(36±1)℃,培养6 h后,取1 mL用O157免疫磁珠进行富集后,接种于O157显色平板和MAC平板18~24 h。
1.2.3 挑取可疑菌落 挑取MAC琼脂平板上发酵乳糖的桃红色、不透明的可疑菌落或O157显色平板上紫红色或淡紫色、中等大小菌落进行生化初筛实验。
1.2.4 生化初筛 凡是TSI斜面产酸或不产酸、底层产酸、不产生H2S的菌株,进行IMViC实验,结果为++--或-+--,尿素-。……
