任岩 曹余恒 李杰萍

脑梗死是神经系统的多发病，约占急性脑血管病的70%~80%，有较高的病死率和致残率，凋亡是脑缺血的神经细胞损伤的重要机制之一。近来研究表明，Caspase-3在各种因素启动的凋亡程序中起重要的枢纽作用。补阳还五汤为《医林改错》中的成方，由黄芪、归尾、赤芍、地龙、川芎、桃仁、红花七味药组成，具有补气活血、疏通经络的功效，是近代医家用于治疗中风的常用方剂之一。本实验应用大鼠脑缺血再灌注（MCAO/R）模型，经腹腔注射补阳还五汤，研究补阳还五汤对神经细胞凋亡和Caspase-3表达的影响，讨论其在脑缺血再灌注损伤中的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验药物 补阳还五汤成分为黄芪60 g，赤芍10 g，川芎10 g，全当归10 g，干地龙10 g，红花10 g，桃仁10 g，药材购自烟台市市直机关医院药剂科并经鉴定，按本室方法制备浓度为1.5 g/mL的水煎醇提液。具体步骤如下：（1）将生药浸入10 倍体积的蒸馏水浸泡2 h；（2）煮沸后文火煎1 h，过滤；（3）再加10倍体积的蒸馏水，煮沸后文火煎1 h，过滤；（4）重复步骤（3）；（5）将以上3次过滤液合并，浓缩成浓度为100%药液，过滤；（6）置于磁力搅拌器上，边搅拌边加入3 倍量无水乙醇，继续搅拌过夜；（7）过滤，2000 rpm/min离心30 min，取上清液；（8）上清液挥发尽乙醇，制成浓度为1.5 g/mL的溶液；（9）高压灭菌后，4 ℃保存。

1.2 制作动物模型 随机选择SPF级成年雌性Wistar大鼠40只（体重230~250 g），由烟台市滨州医学院实验动物中心提供。首先将实验动物放置于实验室内1周，保持自由进食和饮水，维持室温恒定。手术前12小时开始禁食。随机选择30只动物，按照线栓法（经左侧颈外-颈内动脉插线）建立脑缺血2 h后再灌注22 h的动物模型，术后2 h对模型是否成功进行评估，评估标准为出现左侧Horner征、提尾时右前肢屈曲、爬行时向右侧划圈行为。……