杨子良，骆 丹，林秉奖，钱齐宏，余秀琴，王淼淼，闵 玮

（1.苏州大学第一附属医院皮肤科，江苏苏州 215006 2.南京医科大学第一附属医院皮肤性病科，江苏南京 210029）

皮肤鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）是源于表皮角质形成细胞的一种恶性肿瘤，其发病率近年来呈逐年上升的趋势，其病情发展较快并可发生转移，已日益成为威胁人类健康的主要皮肤肿瘤［1］。日光中的紫外线（ultraviolet radiation，UV），尤其是中波紫外线（UVB，波长290～320 nm）是导致皮肤SCC发生的主要环境因素［2-3］。黄芩苷（baicalin）是唇形科植物黄芩的主要有效成分之一，已证实黄芩苷具有抗肿瘤的作用，但其具体作用机制目前尚未完全明了［4］。丝切蛋白-1（cofilin-1）是一种重要的癌细胞转移和入侵的调节因子［5］，我们前期实验中发现，黄芩苷和UVB可明显影响人表皮细胞中cofilin-1的表达［6］。本文将观察黄芩苷和cofilin-1对人皮肤鳞癌细胞的影响，并对相关机制进行探讨。

1 材料与方法

1.1 主要仪器和试剂 人皮肤鳞状细胞癌细胞株A431购自中国科学院上海细胞生物研究所，黄芩苷购自中国药品生物制品检定所，BCA蛋白定量试剂盒Pierce公司，cofilin-1和 β-actin抗体购自 Santa Cruz公司，siRNA由百奥迈科生物技术有限公司合成，脂质体Lipofectamin 2000和TRIzol购自Invitrogen公司，PCR引物由上海生工合成，逆转录试剂盒和实时定量PCR试剂盒购自大连TaKaRa公司，CCK-8试剂盒购自中国Beyotime生物技术有限公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 A431细胞在培养于37℃、5%CO2条件下的细胞培养箱中。当细胞生长至80%融合时，以0.25%胰酶消化，用含10% 小牛血清的DMEM培养基调整其浓度为1×109·L-1，定量接种于培养板和培养皿中，继续培养。黄芩苷组在检测前24 h加入终浓度为50 mg·L-1黄芩苷的培养基进行孵育。……