有机磷农药残留快速检测新技术干式分析法
2014-05-20王倩陈发荣韩琰旭
王倩+陈发荣+韩琰旭
目前检测有机磷农药残留的方法有实验室标准方法和现场快速筛查方法。实验室的标准检测方法主要是高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱法，这两种方法能够提供较高的灵敏度和回收率，但是色谱法需要昂贵的仪器，检测成本高且费时，不适用于大量样品的筛选，也难在基层检测单位以及食品企业推广使用，同时检测时间仍很难满足企业产品质量安全控制的实际需求。现场快速筛查方法快速、经济，但只是实现对待检样品的初步快速筛查，实验结果受人为因素影响较大，不能准确定性、定量和及时记录传输结果。
干式分析法采用北京六角体科技发展有公司研制的便携干式分析仪，结合六角体科技研制的水果、蔬菜中有机磷农药残留快速检测试剂盒，利用便携干式分析仪记录反应结果，达到现场定性定量、快速、准确检测有机磷农药残留的目的。本方法操作简单、检测时间短、对实验人员素质要求不高，可准确定量检测水果蔬菜中有机磷农药残留含量，并可现场记录传输结果，可以满足基层检测及执法单位的需求。
仪器、设备和试剂
便携干式分析仪（北京六角体科技发展有限公司）
水果、蔬菜中农药残留快速检测试剂盒（北京六角体科技发展有限公司）。
实验方法
检测范围
水果、蔬菜。
技术指标
检测下限：0.5mg/kg。
试剂配制
（1）取出胆碱酯酶酶瓶，用2ml缓冲液充分溶解，制备成胆碱酯酶酶液。
（2）取出农残（有机磷）检测渗滤卡，用0.25ml吸管滴加一滴显色剂于中心白片上，（显色剂流动性太强，应等其在吸管中不自动往下滴时再缓慢滴加）晾干，制成显色卡。
样品前处理操作流程
（1）样品提取：称取0.5g待测物（叶菜取叶片、水果取皮等），加入5ml离心管中，吸取2ml缓冲液到5ml离心管中，振摇2分钟，静置分层，上清为提取液
（2）抑制反应：用0.25ml吸管取2滴上述提取液于1.5ml离心管中，再用0.25ml吸管加入2滴胆碱酯酶酶液，混匀，室温反应15分钟；
（3）显色反应：用0.25ml吸管取3滴上述抑制反应液点于显色卡中，室温5分钟观察颜色，上机检测，读取数值。
结果与讨论
干式分析仪快速测定条件的选择
在进行试验测试之前，应先对仪器工作条件进行选择设置。首先打开软件界面填写检测项目设置及企业基本信息设置，之后对卡类型进行选择，最后将检测卡放入卡槽，点击开始测试按钮进行结果的测定。其流程图如图1。
1 检测项目设置
检测项目选择有机磷农药残留，食品种类选择蔬菜。
抽样时间根据具体抽取样品的时间设置。
稀释倍数根据实际稀释情况填写，如果在试验操作中没有对样品进行稀释则填写1，如试验操作过程中将样液进行了稀释，则填写相应的稀释倍数，得到的测试结果要乘以稀释倍数才是最终的试验结果。
样品名称及检测单位根据实际情况填写。
2 企业基本信息设置
企业基本信息设置包括生产企业，被抽检企业，食品名称，产品商标，生产批次及产品规格，对这些内容根据实际的样品信息进行填写。此部分用于对样品的测试结果进行报告分析，不会对测试结果产生直接影响。
3 卡类型选择
卡类型选择：渗滤化学显色卡。
技术验证数据
1 方法的线性
以空白黄瓜为基质分别添加0、0.25、0.5、1.0、2.0mg/kg敌敌畏标准溶液，经前处理过程得到待测物质，上干式分析仪测相应的灰度值，以浓度为横坐标，灰度值为纵坐标，得到标准曲线。
如图2所示，线性范围良好。标准曲线为Y=121.6X+371.6（r=0.9569）。（X为待测物浓度，Y为灰度值）。
2 方法的检出限、添加回收率及精密度
黄瓜中添加敌敌畏和滴灭威回收样品，经干式分析仪测定，回收率和精密度结果如表1。本方法选择0.25、0.8、1.5mg/kg3个添加水平，每个浓度重复测定6次，方法的回收率均在80%～120%之间。
从表1可以看出，0.25mg/kg添加水平符合分析质量要求的试验结果，确定该方法农药残留检出限为0.25mg/kg。
3 基质干扰实验结果
基质效应（Matrix Effects）是指样品基质中的某些共提取物组分对待测组分浓度或质量测定精确度的影响，其机制目前尚未完全清楚。以苹果、茄子、空心菜做为基质，加标1.0、1.5mg/kg敌敌畏，经前处理过程，上干式分析仪测试结果，验证回收实验。
由表2可以看出，苹果、茄子、空心菜的基质对本方法的检测结果影响不大。
4 干式分析法与国标法实际样品检测对照结果
实际样品经国标法G B / T 5009.20—2003测定结果，黄瓜1号为0.5mg/kg、黄瓜2号0.8mg/kg、黄瓜3号0.8mg/kg、黄瓜4号1.5mg/kg。采用本方法进行前处理，运用干式分析仪分析（每个样品平行测定3次）。结果如表3。
从表3中可看出，干式分析的方法结果与国标法检出的结果偏差不大，可满足基层检测及执法单位的需求。endprint
目前检测有机磷农药残留的方法有实验室标准方法和现场快速筛查方法。实验室的标准检测方法主要是高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱法，这两种方法能够提供较高的灵敏度和回收率，但是色谱法需要昂贵的仪器，检测成本高且费时，不适用于大量样品的筛选，也难在基层检测单位以及食品企业推广使用，同时检测时间仍很难满足企业产品质量安全控制的实际需求。现场快速筛查方法快速、经济，但只是实现对待检样品的初步快速筛查，实验结果受人为因素影响较大，不能准确定性、定量和及时记录传输结果。
干式分析法采用北京六角体科技发展有公司研制的便携干式分析仪，结合六角体科技研制的水果、蔬菜中有机磷农药残留快速检测试剂盒，利用便携干式分析仪记录反应结果，达到现场定性定量、快速、准确检测有机磷农药残留的目的。本方法操作简单、检测时间短、对实验人员素质要求不高，可准确定量检测水果蔬菜中有机磷农药残留含量，并可现场记录传输结果，可以满足基层检测及执法单位的需求。
仪器、设备和试剂
便携干式分析仪（北京六角体科技发展有限公司）
水果、蔬菜中农药残留快速检测试剂盒（北京六角体科技发展有限公司）。
实验方法
检测范围
水果、蔬菜。
技术指标
检测下限：0.5mg/kg。
试剂配制
（1）取出胆碱酯酶酶瓶，用2ml缓冲液充分溶解，制备成胆碱酯酶酶液。
（2）取出农残（有机磷）检测渗滤卡，用0.25ml吸管滴加一滴显色剂于中心白片上，（显色剂流动性太强，应等其在吸管中不自动往下滴时再缓慢滴加）晾干，制成显色卡。
样品前处理操作流程
（1）样品提取：称取0.5g待测物（叶菜取叶片、水果取皮等），加入5ml离心管中，吸取2ml缓冲液到5ml离心管中，振摇2分钟，静置分层，上清为提取液
（2）抑制反应：用0.25ml吸管取2滴上述提取液于1.5ml离心管中，再用0.25ml吸管加入2滴胆碱酯酶酶液，混匀，室温反应15分钟；
（3）显色反应：用0.25ml吸管取3滴上述抑制反应液点于显色卡中，室温5分钟观察颜色，上机检测，读取数值。
结果与讨论
干式分析仪快速测定条件的选择
在进行试验测试之前，应先对仪器工作条件进行选择设置。首先打开软件界面填写检测项目设置及企业基本信息设置，之后对卡类型进行选择，最后将检测卡放入卡槽，点击开始测试按钮进行结果的测定。其流程图如图1。
1 检测项目设置
检测项目选择有机磷农药残留，食品种类选择蔬菜。
抽样时间根据具体抽取样品的时间设置。
稀释倍数根据实际稀释情况填写，如果在试验操作中没有对样品进行稀释则填写1，如试验操作过程中将样液进行了稀释，则填写相应的稀释倍数，得到的测试结果要乘以稀释倍数才是最终的试验结果。
样品名称及检测单位根据实际情况填写。
2 企业基本信息设置
企业基本信息设置包括生产企业，被抽检企业，食品名称，产品商标，生产批次及产品规格，对这些内容根据实际的样品信息进行填写。此部分用于对样品的测试结果进行报告分析，不会对测试结果产生直接影响。
3 卡类型选择
卡类型选择：渗滤化学显色卡。
技术验证数据
1 方法的线性
以空白黄瓜为基质分别添加0、0.25、0.5、1.0、2.0mg/kg敌敌畏标准溶液，经前处理过程得到待测物质，上干式分析仪测相应的灰度值，以浓度为横坐标，灰度值为纵坐标，得到标准曲线。
如图2所示，线性范围良好。标准曲线为Y=121.6X+371.6（r=0.9569）。（X为待测物浓度，Y为灰度值）。
2 方法的检出限、添加回收率及精密度
黄瓜中添加敌敌畏和滴灭威回收样品，经干式分析仪测定，回收率和精密度结果如表1。本方法选择0.25、0.8、1.5mg/kg3个添加水平，每个浓度重复测定6次，方法的回收率均在80%～120%之间。
从表1可以看出，0.25mg/kg添加水平符合分析质量要求的试验结果，确定该方法农药残留检出限为0.25mg/kg。
3 基质干扰实验结果
基质效应（Matrix Effects）是指样品基质中的某些共提取物组分对待测组分浓度或质量测定精确度的影响，其机制目前尚未完全清楚。以苹果、茄子、空心菜做为基质，加标1.0、1.5mg/kg敌敌畏，经前处理过程，上干式分析仪测试结果，验证回收实验。
由表2可以看出，苹果、茄子、空心菜的基质对本方法的检测结果影响不大。
4 干式分析法与国标法实际样品检测对照结果
实际样品经国标法G B / T 5009.20—2003测定结果，黄瓜1号为0.5mg/kg、黄瓜2号0.8mg/kg、黄瓜3号0.8mg/kg、黄瓜4号1.5mg/kg。采用本方法进行前处理，运用干式分析仪分析（每个样品平行测定3次）。结果如表3。
从表3中可看出，干式分析的方法结果与国标法检出的结果偏差不大，可满足基层检测及执法单位的需求。endprint
目前检测有机磷农药残留的方法有实验室标准方法和现场快速筛查方法。实验室的标准检测方法主要是高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱法，这两种方法能够提供较高的灵敏度和回收率，但是色谱法需要昂贵的仪器，检测成本高且费时，不适用于大量样品的筛选，也难在基层检测单位以及食品企业推广使用，同时检测时间仍很难满足企业产品质量安全控制的实际需求。现场快速筛查方法快速、经济，但只是实现对待检样品的初步快速筛查，实验结果受人为因素影响较大，不能准确定性、定量和及时记录传输结果。
干式分析法采用北京六角体科技发展有公司研制的便携干式分析仪，结合六角体科技研制的水果、蔬菜中有机磷农药残留快速检测试剂盒，利用便携干式分析仪记录反应结果，达到现场定性定量、快速、准确检测有机磷农药残留的目的。本方法操作简单、检测时间短、对实验人员素质要求不高，可准确定量检测水果蔬菜中有机磷农药残留含量，并可现场记录传输结果，可以满足基层检测及执法单位的需求。
仪器、设备和试剂
便携干式分析仪（北京六角体科技发展有限公司）
水果、蔬菜中农药残留快速检测试剂盒（北京六角体科技发展有限公司）。
实验方法
检测范围
水果、蔬菜。
技术指标
检测下限：0.5mg/kg。
试剂配制
（1）取出胆碱酯酶酶瓶，用2ml缓冲液充分溶解，制备成胆碱酯酶酶液。
（2）取出农残（有机磷）检测渗滤卡，用0.25ml吸管滴加一滴显色剂于中心白片上，（显色剂流动性太强，应等其在吸管中不自动往下滴时再缓慢滴加）晾干，制成显色卡。
样品前处理操作流程
（1）样品提取：称取0.5g待测物（叶菜取叶片、水果取皮等），加入5ml离心管中，吸取2ml缓冲液到5ml离心管中，振摇2分钟，静置分层，上清为提取液
（2）抑制反应：用0.25ml吸管取2滴上述提取液于1.5ml离心管中，再用0.25ml吸管加入2滴胆碱酯酶酶液，混匀，室温反应15分钟；
（3）显色反应：用0.25ml吸管取3滴上述抑制反应液点于显色卡中，室温5分钟观察颜色，上机检测，读取数值。
结果与讨论
干式分析仪快速测定条件的选择
在进行试验测试之前，应先对仪器工作条件进行选择设置。首先打开软件界面填写检测项目设置及企业基本信息设置，之后对卡类型进行选择，最后将检测卡放入卡槽，点击开始测试按钮进行结果的测定。其流程图如图1。
1 检测项目设置
检测项目选择有机磷农药残留，食品种类选择蔬菜。
抽样时间根据具体抽取样品的时间设置。
稀释倍数根据实际稀释情况填写，如果在试验操作中没有对样品进行稀释则填写1，如试验操作过程中将样液进行了稀释，则填写相应的稀释倍数，得到的测试结果要乘以稀释倍数才是最终的试验结果。
样品名称及检测单位根据实际情况填写。
2 企业基本信息设置
企业基本信息设置包括生产企业，被抽检企业，食品名称，产品商标，生产批次及产品规格，对这些内容根据实际的样品信息进行填写。此部分用于对样品的测试结果进行报告分析，不会对测试结果产生直接影响。
3 卡类型选择
卡类型选择：渗滤化学显色卡。
技术验证数据
1 方法的线性
以空白黄瓜为基质分别添加0、0.25、0.5、1.0、2.0mg/kg敌敌畏标准溶液，经前处理过程得到待测物质，上干式分析仪测相应的灰度值，以浓度为横坐标，灰度值为纵坐标，得到标准曲线。
如图2所示，线性范围良好。标准曲线为Y=121.6X+371.6（r=0.9569）。（X为待测物浓度，Y为灰度值）。
2 方法的检出限、添加回收率及精密度
黄瓜中添加敌敌畏和滴灭威回收样品，经干式分析仪测定，回收率和精密度结果如表1。本方法选择0.25、0.8、1.5mg/kg3个添加水平，每个浓度重复测定6次，方法的回收率均在80%～120%之间。
从表1可以看出，0.25mg/kg添加水平符合分析质量要求的试验结果，确定该方法农药残留检出限为0.25mg/kg。
3 基质干扰实验结果
基质效应（Matrix Effects）是指样品基质中的某些共提取物组分对待测组分浓度或质量测定精确度的影响，其机制目前尚未完全清楚。以苹果、茄子、空心菜做为基质，加标1.0、1.5mg/kg敌敌畏，经前处理过程，上干式分析仪测试结果，验证回收实验。
由表2可以看出，苹果、茄子、空心菜的基质对本方法的检测结果影响不大。
4 干式分析法与国标法实际样品检测对照结果
实际样品经国标法G B / T 5009.20—2003测定结果，黄瓜1号为0.5mg/kg、黄瓜2号0.8mg/kg、黄瓜3号0.8mg/kg、黄瓜4号1.5mg/kg。采用本方法进行前处理，运用干式分析仪分析（每个样品平行测定3次）。结果如表3。
从表3中可看出，干式分析的方法结果与国标法检出的结果偏差不大，可满足基层检测及执法单位的需求。endprint
