ELISA定性检测HBsAg灰区和相关实验室结果分析

2014-05-16王红丽田永芳刘小双

中国实验诊断学 2014年2期

关键词：弱阳性表面抗原化学发光

李秀，王红丽，马超，田永芳，刘小双

李秀，王红丽，马超，田永芳，刘小双

（新疆维吾尔自治区人民医院检验科，新疆乌鲁木齐830001）

实际工作中，由于HBsAg浓度低或基因表达变异，出现乙肝表面抗原灰区。本实验正是运用酶免法定性检测HBsAg，同时结合化学发光定量法及核酸DNA检测相关结果，进行对比分析，从而划分灰区范围，准确检出乙肝表面抗原灰区血清，发出正确报告单。

1 材料与方法

1．1 标本来源

我院2011年3月—2012年3月门诊、住院病人筛选出弱阳性标本（0．05＜A＜0．5）48例4种感染模式患者血清。其中HBsAg＋、抗HBeAg＋和抗HBcAg＋感染者HBsAg A值0．1－0．5间27例和0．5－＞1．0（弱阳性报出）13例；HBsAg＋、HBeAg＋和抗HBcAg＋感染者HBsAg A值0．1－0．5间3例和0．5－＞1．0（弱阳性报出）5例。见表1。

1．2 仪器及试剂

1．2．1 ELISA法采用的是厦门英科新创提供的乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒及科华公司立可读乙肝检测试剂盒（用于表面抗原双筛）；洗涤液为英科新创原装洗涤液；洗板机为Rayto RT－3100全自动洗板机及KHB－Wellscan K3酶标仪。

1．2．2 罗氏电化学发光乙肝检测试剂盒及罗氏COBASE601电化学发光分析仪。

1．2．3 Roche Light Cycler 480型全自动荧光实时定量PCR扩增仪及深圳凯杰公司乙肝DNA检测试剂。

1．3 资料统计处理

资料由LIS数据库整理后，EXCEL软件包做统计学处理，统计学方法用百分比计算。

2 结果

表1 低浓度HBsAg病人乙肝定量、定性检测结果

从表中所见，HBsAg＋、抗HBeAg＋和抗HB－cAg＋感染模式中27例（56．2%）HBsAg弱阳性病人Els法定性所测A值是0．1－0．5间，用Ecl法检测HBsAg为1－10COI（＞1COI为阳性），DNA拷贝均≤103IU／ml。13例（27．1%）HBsAg＋、抗HBeAg＋和抗HBcAg＋感染模式HBsAg弱阳性病人，Els法定性初筛用英科新创乙肝表面检测试剂盒，复筛用上海科华乙肝表面检测试剂盒，A值结果是弱阳性，一个是阳性，在0．5－＞1．0间，仍按弱阳性报出，其Ecl法检测值为10－100COI，核酸DNA≤103IU／ml。5例（10．4%）HBsAg＋、HBeAg＋和抗HBcAg＋感染模式的病人，HBsAg Els法A值0．5－＞1．0，其Ecl法HBsAg＞100COI或更高；HBeAg＞500COI或更高，核酸≥103IU／ml。3例（6．2%）HBsAg＋、HBeAg＋和抗HBcAg＋感染模式的病人，HBsAg Els法A值0．1－0．5间，其Ecl法在1－10COI间，DNA≤103IU／ml。见表1。