嗜酸乳杆菌NCFM 表层蛋白的提取及其与菌体酸和胆盐耐受及粘附性能的关系
2014-05-10胡斌田丰伟赵建新张秋香王刚张灏陈卫
胡斌,田丰伟,赵建新,张秋香,王刚,张灏,陈卫
(江南大学 食品科学与技术国家重点实验室 食品学院,江苏无锡 214122)
表层蛋白(Surface Layer Protein,SLP)是一种可被蛋白酶K特异性水解,以非共价键与细胞壁结合的细胞包被结构。这层蛋白结构,其蛋白含量占细菌细胞总蛋白的10%~15%,用提取剂去除后,菌体能够重新组装SLP结构[1]。研究表明,SLP的功能除了保护和维持细胞形态之外,还是胞外酶结合位点、菌体与细胞粘附表面识别位点,还有可能是致病菌的毒力因子[2]。SLP的多种功能特性引起了微生物学和材料学的广泛关注。
嗜酸乳杆菌NCFM是一株分离自人体肠道且全基因组测序的益生菌[3],目前已应用在婴儿配方乳粉、酸奶和液态乳制品中。NCBI检索得到该菌株共有3个SLP 基因,即 slpA (Gene ID: 3252774)、slpB (Gene ID: 3252692)和 slpX (Gene ID: 3253051),SlpA、SlpB和SlpX蛋白分子量分别为46、47、51kD[4],并已有学者对其性质展开研究,发现SLP可以调控人体肠道免疫树突状细胞与T细胞功能[5];敲除slpA基因后,嗜酸乳杆菌NCFM对Caco-2细胞的粘附力下降84%[6]。
作为一株全基因组测序益生菌的功能结构,嗜酸乳杆菌NCFM的SLP具备了序列清晰,应用安全的优点,是极具潜力的研究和应用对象,提高 SLP提取效率是对其深入研究的技术前提。另外,良好的胃酸、胆盐耐受力以及对肠道上皮细胞的粘附力是嗜酸乳杆菌NCFM作为益生菌的必要前提。利用SLP的再生能力,本研究为SLP与嗜酸乳杆菌NCFM菌体酸、胆盐耐受能力和粘附性能的关系提供了直接证据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
嗜酸乳杆菌NCFM(Lactobacillus acidophilus NCFM) 江南大学食品生物技术研究中心保藏;HT-29细胞 中科院上海细胞研究所;……
