梁昌聪 刘磊 张建华 郭立佳 王伟伟 黄俊生

摘 要 采用响应面法对绿色木霉H06菌株产孢发酵培养基进行了优化。首先利用Plackett-Burman实验设计筛选出影响产孢的 3个主要因素： 玉米粉、大豆粕和 KH2PO4。在此基础上运用最陡爬坡路径法逼近最大响应值区域，最后利用响应面分析法确定主要因子之间的交互作用及最佳条件。结果表明，蔗糖10 g/L、玉米粉12.75 g/L、NH4NO3 2 g/L、大豆粕4.65 g/L、MgSO4·7H2O 1 g/L、KH2PO4 3.32 g/L、H06最大理论孢子含量为3.29×109个/mL。经3次平行实验验证，实际平均孢子含量与预测孢子含量相近，比之前的孢子含量提高了197%。

关键词 响应面法；绿色木霉；产孢；优化

中图分类号 S216.2 文献标识码 A

香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌引起的一种毁灭性的土传病害，已严重危害到香蕉的生产及香蕉产业[1]。目前综合防控技术是香蕉枯萎病防治的主要手段，木霉（Trichoderma spp.）作为一种重要的植病生防菌一直受到普遍关注。绿色木霉菌（Trichoderma viride）广泛地分布于自然界，可在多种营养基质上快速生长， 对多种植物病原菌有重寄生作用，能有效地竞争营养和生存空间，还可以产生抗生素和攻击多种病原所需要的酶，所以被认为是一种很有开发潜力的生防菌[2]。

绿色木霉菌H06（T. viride）是中国热带农业科学院环境与植物保护研究所微生物资源研究与利用课题组从香蕉根际土壤中分离获得的拮抗镰刀菌的菌株，对香蕉枯萎病等植物病害有明显的防治效果[3]，应用前景广阔。

响应面分析法（Response Surface Methodology，RSM），包括试验设计、建立模型、分析模型合理性和寻求最优解等众多试验与统计技术。……