浒苔和江蓠中抑藻活性物质提取初步研究*
2014-04-22孙颖颖黄晓斌董晓柯李光成王长海
孙颖颖,沈 桥,黄晓斌,董晓柯,李光成,王长海
(1.淮海工学院 海洋学院,江苏 连云港 222005;2.南京农业大学 资源与环境科学学院,江苏 南京 210095)
0 引言
研究表明,海藻体内的某些次生代谢物是抑制微藻生长的主要原因[1-2],已经鉴定出某些海藻体内的抑藻物质,例如墨角藻中的聚酚[3]、海头红体内的单萜[4]、川蔓体内的二萜[5]、小珊瑚藻中的溴仿[6]和孔石莼体内的不饱和脂肪酸[7]等,能显著抑制微藻的生长。海藻通过渗滤、挥发和分泌等多种方式将生物碱、酚酸、脂肪酸、硫化物、糖苷、萜类、内酯、鞣酸、有机酸和糖类等物质释放到环境中[3-7]。
前期研究表明,浒苔(Enteromorphaprolifera)和江蓠(Gracilarialemaneiformis)中含有能明显抑制米氏凯伦藻和中肋骨条藻等赤潮微藻生长的物质[8-9],并采用甲醇浸泡制备到具有明显抑藻活性的提取物[10-11]。然而,由于采用甲醇和丙酮浸泡制备的海藻提取物含有较高含量的色素,在祛除色素过程中致使活性组分损失较多。因此,本文采用乙醚浸泡浒苔和江蓠粉末,经过滤、浓缩和液液萃取分离,制备到海藻分离组分。在此基础上,利用化合物鉴定试验(主要是生物碱、酚酸和内酯、香豆素检测)对这些海藻组分进行定性,并采用抑藻活性检测方法,确定活性组分。更进一步,采用硅胶GF254薄层层析检测,确定上述活性组分的适宜展开剂,为后续分离纯化2种海藻的抑藻活性物质奠定实验基础。
1 材料和方法
1.1 实验材料
中肋骨条藻无菌株由中国海洋大学提供,经进一步分离纯化后由淮海工学院江苏省海洋生物技术重点实验室保存,在f/2培养基[14]中培养,培养温度(20±0.1)℃,光照强度40μmol/(m2·s1),光暗比12∶12。……
