唐红卫，王成彬

解放军总医院 临床检验科，北京 100853

NF-κB及p38MAPK信号通路对支气管上皮细胞与中性粒细胞共培养IL-6分泌的调控作用

唐红卫，王成彬

解放军总医院 临床检验科，北京 100853

目的 探讨支气管上皮细胞(bronchial epithelial cells，BEAS-2B)与中性粒细胞(neutrophils，NEU)联合培养时IL-6分泌的机制。方法免疫磁珠法提取外周血中性粒细胞，建立中性粒细胞与BEAS-2B细胞联合培养体系。应用Roche cobas e411检测上清液中IL-6浓度。结果BEAS-2B和中性粒细胞联合培养时，上清液IL-6浓度为(3 691±482.3) pg/ml，与细胞单独培养[BEAS-2B(313.4±34.7) pg/ml；NEU(219.1±11.3) pg/ml]差异有统计学意义(P＜0.001)；蛋白质印迹法(Western blotting)结果显示BEAS-2B和中性粒细胞联合培养可激活BEAS-2B细胞内NF-κB及p38MAPK的信号通路；而加入NF-κB通路抑制剂MG-132，可有效抑制上清液中IL-6的分泌[(1 075.3±83.9) pg/ml vs (3 691±482.3) pg/ml，P＜0.01]；p38MAPK通路抑制剂SB203580亦能抑制IL-6的分泌[(1 532.8±176.1) pg/ml vs (3 691±482.3) pg/ml，P＜0.01]；且MG-132的抑制效果明显好于SB2035580[(1 075.3±83.9) pg/ml vs (1 532.8±176.1) pg/ml，P＜0.01]；当联合使用两种抑制剂(MG-132和SB203580)时可进一步减少IL-6的分泌[(353.1±33.5) pg/ml vs (1 075.3±83.9) pg/ml，P＜0.01；(353.1±33.5) pg/ml vs (1 532.8±176.1) pg/ml，P＜0.01]。结论BEAS-2B细胞与NEU细胞接触后激活BEAS-2B细胞体内NF-κB及p38MAPK通路，进而调控IL-6的分泌。

支气管上皮细胞；中性粒细胞；IL-6；信号通路；

细胞因子(cytokines，CK)可调控炎症反应或作为炎症反应的效应分子，参与炎症细胞的发育、成熟、分化、募集、活化的各个环节，因此在气道炎症性疾病的发病机制中发挥重要作用。白介素-6(interleukelin-6，IL-6)是细胞因子大家庭的重要一员，主要由单核巨噬细胞、内皮细胞、上皮细胞及淋巴样细胞产生，是一种多效应细胞因子[1-2]。在气道炎症发病机制中，IL-6主要作为协同因子与IL-4、IL-5、IL-13促进B细胞分化成熟与IgE合成，但IL-6不能单独使静息的B细胞合成IgE[3-5]。一些研究表明支气管上皮细胞与嗜酸性粒细胞联合培养可刺激IL-6的分泌，并且IL-6的分泌与NF-κB及p38MAPK信号转导通路密切相关[6-7]。……