APP下载

运脾温阳颗粒对脾虚泄泻大鼠胃黏膜结构及血浆中CCK、PP浓度的影响

2014-04-18邵南齐高青朱萱萱王海丹付金芳代永霞

江苏中医药 2014年9期
关键词:温阳脾虚血浆

邵南齐 高青 朱萱萱 王海丹 付金芳 代永霞

(1.郑州澍青医学高等专科学校,河南郑州 450064;2.江苏省中医院,江苏南京 210029)

运脾温阳颗粒对脾虚泄泻大鼠胃黏膜结构及血浆中CCK、PP浓度的影响

邵南齐1高青1朱萱萱2王海丹2付金芳1代永霞1

(1.郑州澍青医学高等专科学校,河南郑州 450064;2.江苏省中医院,江苏南京 210029)

目的:探讨运脾温阳颗粒对脾虚泄泻大鼠胃黏膜结构及血浆中胆囊收缩素(CCK)、胰多肽(PP)浓度的影响。方法:用大黄加饮食失节法制作大鼠脾虚泄泻模型,将造模成功大鼠随机分为模型组、思密达组和运脾温阳颗粒高、中、低剂量组,每组10只,另取同批次正常大鼠10只作为正常组,分别灌胃相应药物或生理盐水10d后,检测大鼠胃黏膜细胞形态学改变和血浆中CCK、PP浓度。结果:脾虚泄泻模型大鼠胃黏膜细胞受损,血浆CCK浓度下降,PP浓度升高;给予高、中剂量运脾温阳颗粒治疗后,上述指标均得以明显改善而接近正常大鼠。结论:运脾温阳颗粒改善脾虚泄泻大鼠症状可能是通过保护胃黏膜细胞,调整血浆中CCK、PP浓度而发挥作用的。

泄泻脾虚 运脾温阳颗粒 胃黏膜 胆囊收缩素 胰多肽 实验研究

运脾温阳颗粒是由苍术、山楂、炮姜、肉豆蔻、茯苓、泽泻等六味药(其质量比为10∶10∶3∶6∶10∶10)采用现代工艺制成的颗粒剂,临床上用于治疗小儿迁延性腹泻,总有效率达93%[1]。前期研究发现,运脾温阳颗粒能使脾虚小鼠的炭末推进率减慢,可增强阿托品抑制肠蠕动的作用,修复脾虚大鼠的小肠黏膜以及升高脾虚大鼠血液中NO和胃泌素浓度,从而改善胃肠功能[2-4]。本研究将进一步观察运脾温阳颗粒对脾虚模型大鼠的胃黏膜形态学和血浆中胆囊收缩素(CCK)、胰多肽(PP)浓度的影响。

1 实验材料

1.1 动物SD大鼠,雄性,体重200~220g,由南通大学实验动物中心提供,合格证号:scxk(苏)2012-0008。

1.2 药品及试剂运脾温阳颗粒:由江阴天江药业有限公司提供(批号20120115);思密达:由博福-益普生(天津)制药有限公司提供(批号E15565)。胆囊收缩素(Cholecystokinin,CCK)试剂盒:美国BD公司生产,批号:201326KO;胰多肽(panoreatio polypeptide,PP)试剂盒:美国BD公司生产,批号:20130326TY。

1.3 器材FA1004型电子分析天平(上海菁海仪器有限公司),DD-5000型大容量低速离心机(长沙英泰仪器有限公司),UV-2000紫外-可见分光光度计(尤尼科上海仪器有限公司)等。

2 实验方法

2.1 造模与分组、给药造模组大鼠采用大黄苦寒泻下结合饮食失节法制作脾虚大鼠模型,每日灌胃给予100%大黄水提液(0.2mL/10g,1次/d),灌胃前禁食8h,自由饮水,造成饮食失节,连续灌胃14d,出现类似临床脾阳不足泄泻的症状如便溏、纳呆、体重减轻、体温偏低、畏寒等作为脾虚指标。造模成功的大鼠随机分为模型组、思密达组和运脾温阳颗粒高、中、低剂量组,每组10只。另取同批次正常大鼠10只为正常组。正常组、模型组大鼠给予等量生理盐水,自由饮食;思密达组给予2.13g/kg思密达;运脾温阳颗粒高、中、低剂量组分别给予30.0g/kg、15.0g/kg、7.5g/kg运脾温阳颗粒。各组大鼠每日定时灌胃给药,1次/d,连续10d。

2.2 取样及检测末次给药2h后,大鼠眼眶取血4mL,注入试管中,3000r/min离心,取血浆,用酶联免疫法检测CCK、PP,同时将大鼠脱颈椎处死,取胃,用10%福尔马林固定胃,送病理检查。

3 实验结果

3.1 一般状态造模前,所有大鼠一般生理性自主活动良好,活动敏捷,饮食、二便、皮毛均正常,组间无显著性差异。实验期间,与正常组比较,模型组动物逐渐出现便溏、肛门污秽、消瘦、活动逐渐减少、拱背、扎堆、眯眼、毛发干枯无光泽等症状。各治疗组大鼠每日体重缓慢增加,大便逐渐变稠到干,活动增多,毛发蓬松有光泽接近正常组。实验末,模型组大鼠体重严重下降,与正常组比较有非常显著性差异(P<0.01);运脾温阳颗粒高、中剂量组大鼠体重比模型组显著增加(P<0.01)。提示运脾温阳颗粒对大黄和饮食失节致脾虚大鼠体重减轻有一定的改善作用,见表1。

3.2 胃黏膜组织学正常组:胃组织及小肠组织黏膜层黏膜上皮细胞及腺体排列整齐,无明显变性坏死,无充血,黏膜下层无炎细胞浸润,无水肿。模型组:胃组织局部黏膜下层可见少量炎细胞浸润,无水肿。思密达组:胃部及小肠组织黏膜层黏膜上皮细胞及腺体排列整齐,无明显变性坏死,无充血,黏膜下层无炎细胞浸润,无水肿。运脾温阳颗粒高剂量组:胃黏膜层黏膜上皮细胞及腺体排列整齐,无明显变性坏死,无充血,黏膜下层无炎细胞浸润,无水肿。运脾温阳颗粒中剂量组:胃组织局部黏膜下层可见少量炎细胞浸润。运脾温阳颗粒低剂量组:胃组织局部黏膜下层可见少量炎细胞浸润。见图1。

3.3 血浆中CCK和PP含量模型组大鼠血浆中CCK浓度明显低于正常组(P<0.01),而PP的浓度明显高于正常组(P<0.01)。运脾温阳颗粒高、中剂量组大鼠血浆中CCK明显高于模型组(P<0.01或P<0.05),PP的浓度明显低于模型组(P<0.01或P<0.05)。提示运脾温阳颗粒对大黄和饮食失节致脾虚大鼠的治疗作用可能与调节血中CCK和PP的浓度有关。见表2。

4 讨论

迁延性腹泻是儿科临床常见病,主要表现为稀便、大便次数增多,如不及时治疗导致严重水电解质紊乱可危及小儿生命。迁延性腹泻属于中医久泻、慢性腹泻范畴。中医儿科专家江育仁认为脾虚失运和气虚阳亏是小儿迁延性腹泻的基本病机[5],遂提出运脾温阳法治疗小儿迁延性腹泻。运脾温阳颗粒方中苍术运脾燥湿为主药,佐以山楂消积导滞,炮姜、肉蔻温运脾阳,茯苓、泽泻健脾渗湿。全方具有运脾温阳、消积导滞渗湿的功能。

大黄苦寒,有较强的泻下功用,久服可使机体元气损伤,脾胃功能减弱,从而影响水谷精微的吸收。本实验中,大鼠灌胃大黄后逐渐出现便溏、肛门污秽、消瘦、活动逐渐减少、拱背、扎堆、眯眼、毛发无光泽的现象符合中医脾虚泄泻症候的特点[6]。

本实验中,脾虚大鼠出现泄泻、消瘦,影响食物的消化吸收,胃组织局部黏膜下层见少量炎细胞浸润,给予大剂量运脾温阳颗粒后胃黏膜修复正常,说明运脾温阳颗粒可以修复胃黏膜结构,有助于改善脾虚症状。

CCK和PP是重要的胃肠激素。CCK主要来源于十二指肠和上段空肠的I细胞,能促进胆囊收缩,同时增加胆汁分泌,抑制胃排空,调节胃肠运动,促进胰腺腺泡分泌各种消化酶,提高消化能力[7]。PP是由胰腺和胃肠内的PP细胞分泌的多肽激素,PP抑制食欲,减少摄食量,其分泌与体重呈负相关,目前研究发现PP抑制胆囊收缩素、胰酶和胆汁的释放,同时收缩胆总管括约肌,但松弛胆囊平滑肌,影响脂质的消化吸收[8-11]。因此,CCK和PP对胆汁分泌的影响作用相反。

本实验中脾虚大鼠胃排空加速,肠蠕动加快,腹泻,脂类物质消化吸收受影响,血浆中CCK浓度下降,而PP浓度升高。经运脾温阳颗粒治疗后脾虚大鼠血浆中CCK浓度显著升高,PP浓度显著降低。因此我们可以推测,运脾温阳颗粒修复胃黏膜、减慢胃排空速度、改善胃肠营养物质消化吸收、有效改善脾虚泄泻大鼠的临床症状等功效,可能是通过调节CCK和PP等胃肠激素水平而实现的。

表1 各组大鼠实验不同时期体重比较(±s)g

表1 各组大鼠实验不同时期体重比较(±s)g

注:与正常组比较,△△P<0.01;与模型组比较,**P<0.01。

组别动物数(只)正常组剂量(g/kg)10实验前开始给药(造模结束)时-实验末(给药10d后)208.0±7.1279.5±11.2324.5±10.1**模型组-212.0±7.9168.0±12.3△△189.5±17.6△△10思密达组102.13210.0±8.5162.5±8.9△△229.0±14.3△△**运脾温阳颗粒高剂量组1030.0212.0±7.5166.0±8.8△△233.5±8.8△△**运脾温阳颗粒中剂量组1015.0210.0±7.5174.0±10.7△△221.5±12.3△△**运脾温阳颗粒低剂量组107.5211.0±7.4170.0±8.89△△200.5±10.7△△

图1 各组大鼠胃黏膜组织形态学改变(×100)

表2 各组大鼠血浆中CCK和PP含量比较(±s)

表2 各组大鼠血浆中CCK和PP含量比较(±s)

注:与正常组比较,△P<0.05,△△P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。

组别剂量(g/kg)CCK(pg/mL)正常组PP(pg/mL)-533.8±39.2**97.60±9.7**模型组117.5±7.8△△-454.7±18.8△△思密达组2.13524.2±38.1**98.2±7.7**运脾温阳颗粒高剂量组30.0540.8±52.7**99.9±3.2**运脾温阳颗粒中剂量组15.0498.1±44.9*109.1±3.8*△运脾温阳颗粒低剂量组7.5492.0±59.5114.4±8.4△△

[1]刘丽.运脾温阳法治疗迁延性腹泻脾阳虚证临床研究.南京:南京中医药大学,2007

[2]严士海,朱萱萱.运脾温阳颗粒对胃肠功能影响的实验研究.长春中医药大学学报,2006,22(4):8

[3]王清,朱萱萱,于莉,等.运脾温阳方及其拆方对脾虚大鼠小肠病理结构影响的研究.实用中医内科杂志,2009,23(6):36

[4]邵南齐,朱萱萱.运脾温阳颗粒对利血平致脾虚大鼠胃肠调节因子NO和胃泌素影响的实验研究.中华中医药学刊,2007,25 (12):2618

[5]江育仁.脾健不在补贵在运.中医杂志,1983,7(1):6

[6]苗明三.常用中医药研究动物模型.北京:中国中医药出版社,1997:91

[7]姚泰.生理学.2版.北京:人民卫生出版社,2010:259

[8]JesudasonDR,MonteiroMP,McgowanBM,etal.Low-dose pancreatic polypeptide inhibits food intake in man.Br J Nutr,2007,97:426

[9]刘艳华,李晓南.脑肠肽、摄食调控与肥胖关系的研究进展.国际消化病杂志,2012,30(6):357

[10]COLLOMBAT P,HECKSHER-SORENSEN J,KRULL J,et al. Embryonic endocrine pancreas and mature beta cells acquire alphaandPPcellphenotypesuponArxmisexpression.J ClinInvest,2007,117(4):961

[11]KU SK,LEE HS.An immunohistochemical study of the pancreatic endocrinecellsofthenudemouse,Balb/c-nu/nu.EurJ Histochem,2006,50(1):61

R256.340.5文献识别码A

1672-397X(2014)09-0075-03

邵南齐(1973-),男,硕士,讲师,中药药理学专业。shaonanqi@126.com

2014-04-01

编辑:吴宁

澍青医专重点科研项目(12001)

猜你喜欢

温阳脾虚血浆
糖尿病早期认知功能障碍与血浆P-tau217相关性研究进展
阴寒体质化痰除湿需补阳温阳
血浆置换加双重血浆分子吸附对自身免疫性肝炎合并肝衰竭的细胞因子的影响
瘦成一道闪电先过“脾虚”这关
为什么那么多人“脾虚”
CHF患者血浆NT-proBNP、UA和hs-CRP的变化及其临床意义
推拿结合热敏灸治疗脾虚湿滞型假性近视的临床疗效观察
脑卒中后中枢性疼痛相关血浆氨基酸筛选
温阳解郁汤治疗脾肾阳虚型抑郁症30例
益气温阳法治疗心力衰竭30例