王洪珍，史红锦

（镇江市妇幼保健院1．生殖技术科，2．宫颈病科，江苏镇江212001）

感染人乳头瘤病毒女性子宫颈病变情况分析

王洪珍1，史红锦2

（镇江市妇幼保健院1．生殖技术科，2．宫颈病科，江苏镇江212001）

目的：探讨镇江地区感染人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）的女性子宫颈病变情况及HPV基因型别分布特点。方法：选择在19种HPV基因型感染筛查中HPV结果阳性的女性978名，进行阴道镜检查并活检，以病理结果作为诊断宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）的金标准。结果：978名女性中无CIN病变、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ和宫颈癌的检出率分别为89．26%（873／978）、5．42%（53／978）、4．91%（48／978）和0．41%（4／978），CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ和宫颈癌组的HPV基因型别分布有差异，随宫颈病变程度增高，16和18型的HPV检出比例增加，宫颈高度病变患病高峰为36～40岁年龄段。978名妇女检出19种基因型HPV共1 240频次，其中高危型931例（75．08%），以HPV52、58、16、51、18和39型多见，低危型97例（7．82%），以HPV43型多见，中国人常见亚型共212例（17．10%），以HPV53、CP8304型多见；HPV单一型别感染为80．16%（784／978），多重型别混合感染为19．84%（194／978），多重感染率随年龄增长呈下降趋势。不同等级宫颈病变间的HPV多重感染率差异无统计学意义（P＞0．05）。结论：镇江地区生殖道有HPV感染的女性子宫颈病变多处于发病早期，子宫颈病变严重程度与HPV多重感染无关，而与不同基因型HPV感染有关，HPV16／18型与宫颈病变进展关系密切。

人乳头瘤病毒；宫颈病变；基因分型

子宫颈癌是全球女性的第二位常见恶性肿瘤，人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染是宫颈癌发生的主要因素。大量流行病学研究和分子生物学研究发现99．7%以上的宫颈癌有HPV感染［1］，且不同基因型HPV致癌风险有差异［2］。近年来，我国宫颈癌的发生有上升趋势，且患者越来越年轻化。目前国内有关HPV感染的流行病学现状及HPV与宫颈病变的关系已成为研究热点。本研究尝试以来本院作HPV感染筛查结果阳性的女性为研究对象，调查HPV感染人群的宫颈病变患病率及HPV型别分布情况，现报告如下。

1 对象与方法

1．1 研究对象

2013年8月至2014年1月在我院接受19种HPV基因型感染筛查，其中HPV结果阳性的女性978名，年龄17～70（38．3±12．1）岁，全部接受了阴道镜下宫颈活组织病理学检查。剔除拒绝作阴道镜检查者和二次复查数据。

1．2 检测方法

1．2．1 HPV基因分型检测 HPV基因分型检测试剂盒由中山大学达安基因服务有限公司提供，按试剂盒操作流程说明，在ABI 9700 PCR仪上定性扩增，膜条杂交显色后由MicroTEK4850Ⅱ扫描仪扫描，应用达安图像分析软件分析结果。根据杂交位点不同可检测13种高危型HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型），3种中国人常见亚型HPV（53、66、CP8304型）和3种低危型HPV（6、11、43型）的型别。

1．2．2 阴道镜下宫颈活检 在受检者月经周期第8～12天采用金科威公司生产的SLC-2000B型电子阴道镜进行检查。检查前3 d内无性生活及阴道用药史。阴道镜下于宫颈阴道部先后以5%醋酸和卢戈氏碘液涂抹宫颈，镜下观察，于宫颈不同点采取活检标本分瓶保存，甲醛固定。检查结果不满意时均行颈管搔刮术，发现可疑病灶后再采取标本。所有阴道镜下活检标本均常规制作石蜡切片，HE染色，由病理学医师阅片并进行诊断。

1．3 统计学方法

采用SPSS 13．0统计软件，不同等级宫颈病变HPV多重感染率间的差异比较采用χ2检验，P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 HPV感染人群宫颈病变患病率

978例HPV阳性女性均接受阴道镜检查并活检，以病理结果作为诊断宫颈上皮内瘤变（CIN）的金标准，根据病理结果将受试者分为无CIN病变组，CINⅠ组，CINⅡ-Ⅲ组和宫颈癌组共4组，各组例数占比分别为89．26%（873／978）、5．42%（53／978）、4．91%（48／978）和0．41%（4／978）。

2．2 HPV基因型分布

978例HPV阳性标本检出19种HPV基因型，1 240频次（表1）。其中，13种高危型HPV检出率为75．08%（931／1 240），按感染人数比例的高低，前6位为HPV52、58、16、51、18和39型。3种中国人常见HPV亚型检出率为17．10%（212／1 240），以HPV53、CP8304型多见，3种低危型HPV检出率为7．82%（97／1 240），以43型多见。单一型别感染为80．16%（784／978），多重感染（一人同时感染2种及2种以上的型别）为19．84%（194／978），其中双重感染为14．52%（142／978），三重及以上感染为5．32%（52／978），检出三重感染40例，四重感染9例，五重感染2例，六重感染1例。

2．3 宫颈病变与感染HPV基因型的关系

高危型HPV基因型在不同级别宫颈病变中分布有差异，无CIN病变组检出前6位为HPV52、58、16、51、18、39型，CINⅠ组检出前6位为HPV58、52、51、16、39、56型，CINⅡ-Ⅲ组检出前6位为HPV16、58、33、31、18、52型，宫颈癌共4例，检出3种高危型HPV，分别为HPV16、18、58型。随宫颈病变级别增高，HPV16、18型的检出比例增加。HPV多重感染在无CIN病变组，CINⅠ组，CINⅡ-Ⅲ组和宫颈癌组的感染率分别为18．79%（164／873）、32．08%（17／53）、25．00%（12／48）和25．00%（1／4），各组多重感染率间比较差异无统计学意义（χ2＝6．471，P＝0．091），可见HPV多重感染率并不随宫颈病变级别增加而增高。见表1。

2．4 各年龄组不同等级宫颈病变的患病率和HPV多重感染率

978例按5岁年龄段分组，20岁以下人数偏少并入21～25岁年龄段（17～25岁组），51岁以上人数偏少合并为51～70岁组。结果显示，宫颈低度病变率在46～50岁组稍高（7．38%），其他组较为平稳；宫颈高度病变率随年龄增长逐渐增高，36～40岁组达高峰（10．48%），40岁后随年龄增长有下降趋势，至51～70岁组，患病率又升高至7．21%；宫颈总病变率随年龄增长逐渐增高，36～40岁组达高峰（15．24%），40岁后有所下降，但仍持续处于高位（13%左右）。HPV多重感染率随年龄增长总体呈下降趋势。见表2。

3 讨论

高危型HPV生殖道持续感染是宫颈癌及癌前病变发生发展的主要因素。目前国内各地区有关HPV感染与宫颈病变关系的调查研究已广泛开展。本研究选择HPV阳性人群为研究对象，调查本地区感染HPV的女性不同等级宫颈病变患病率及HPV基因型分布情况。镇江市区拥有100万左右人口，由于市妇幼保健院的性质，每年在我院作癌前筛查女性达3万多人，年龄从17岁到70岁不等，覆盖范围广，基本能代表镇江市区女性的整体情况。

本次调查结果显示，镇江市区女性生殖道HPV感染以高危型HPV为主，占75．08%，检出数前6位为HPV52、58、16、51、18和39型，与盐城［3］地区高危型HPV排位顺序（HPV16、52、58、39、18和33型）和西安地区［4］高危型HPV排位顺序（HPV16、58、52、33、31和18型）有差异；HPV中国人常见亚型占17．10%，较国内一般报道高，以53和CP8304型为主；低危型HPV占7．82%，较国内一般报道低，以43型为主，与南京地区相似［5］。

镇江市区HPV感染女性中，无CIN病变人群占89．26%，无CIN病变组中高危型HPV检出前6位与HPV感染人群整体分布相同，为HPV52、58、16、51、18和39型。

本研究中，CINⅠ级人数占5．42%。CINⅠ组的HPV基因型分布中，中国人常见亚型53型和高危型58型比例最高（均为12．16%），高危型HPV检出前6位为58、52、51、16、39和56型。广州地区［6］CINⅠ级组高危型HPV检出前6位为52、16、68、33、18和58型。王宏景等［7］收集的江苏各地区石蜡组织标本的HPV型别研究中，CINⅠ组检出高危型HPV前6位为HPV16、18、33、58、31和59型，提示可能由于地区不同或标本类型不同导致HPV基因型检出率不同，排位不同。

镇江市区HPV感染女性中，CINⅡ-Ⅲ级人数占4．91%，CINⅡ-Ⅲ组中高危型HPV检出前6位为16、58、33、31、18和52型，广州地区［6］CINⅡ-Ⅲ级组高危型HPV检出前6位为16、58、33、18、52和31型，两地区CINⅡ-Ⅲ组感染的高危型HPV主要型别相同，仅31型的排位有差异；王宏景等［7］研究的江苏各地区石蜡组织标本中，CINⅡ-Ⅲ组中高危型HPV检出前6位为16、18、33、58、31和52型，HPV型别与前两者相同，但排位差异大。

镇江市区HPV感染女性中，宫颈癌的人数占0．41%，由于研究人群数量限制，仅检出3种高危型HPV：16、18和58型。广州地区［6］宫颈癌组中高危型HPV检出前6位为16、18、58、52、31和68型，两地区已有排名相似。王宏景等［7］研究的石蜡组织标本的宫颈癌组高危型HPV检出前6名为16、18、33、58、31和52型，与前两者的排名仍有较大差异。

地区不同，HPV基因型分布有差异，随着宫颈病变级别升高，HPV基因型分布与排位趋于一致，16与18型的检出比例均明显增加，提示宫颈病变严重程度与感染的HPV基因型别有关。广州地区与本研究检测HPV所用标本均为宫颈脱落细胞，王宏景等［7］研究的是石蜡组织标本，三者HPV的检出差异是否与标本类型有关，尚待方法学的进一步验证。

Lee等［8］认为HPV多重感染者发生宫颈癌的危险性比单一型别HPV感染者高，也有学者［9］报道年轻妇女中普遍存在HPV多重感染，不确定多重感染是否增加宫颈病变的危险性。而本研究显示HPV多重感染与宫颈病变的严重程度无关。

监测HPV基因型别的流行趋势及其与宫颈癌发展演变关系可为宫颈癌及HPV感染相关疾病的防治提供有价值的分子流行病学资料，可为本地区HPV多价疫苗的开发及应用提供参考数据，更有助于政府部门公共卫生决策的制定。

本调查结果显示，不同年龄段的HPV多重感染率调查发现，镇江地区25岁以前HPV多重感染率最高，为26．3%；26～35岁段较高而平稳，为21%左右；35岁后随年龄增长，HPV多重感染率逐渐下降。这可能与生理的性行为活跃程度和性伴侣数量有关，随着年龄增长，性伴侣相对固定，性需求减弱。

不同年龄段的宫颈低度病变率变化不明显（5%左右），仅46～50岁段略高（7．38%）；宫颈高度病变率随年龄增长呈上升趋势，36～40岁达高峰，40岁以后略有下降，仍持续高位。故35岁以上女性有必要定期进行宫颈病变筛查，以便早期发现，早期治疗。

本研究中HPV感染者宫颈的CIN及以上病变的总病变率为10．74%，大多宫颈病变处于发病早期阶段，宫颈癌仅占0．41%。而很多调查结果显示HPV感染人群的无CIN病变人数低于有CINⅠ及以上级别病变人数［6，10］。这可能与本研究调查对象为来本院就诊自愿做癌前筛查者，而其他研究调查对象主要为妇科就诊人群且其宫颈多有病变有关。因此育龄女性尤其35岁以上女性不论是否有宫颈病变症状，都应定期作宫颈癌前筛查，如发现感染HPV，即使是高危型HPV时也不必恐慌，通过干预治疗可阻止感染向宫颈癌方向发展。

综上，镇江地区生殖道HPV感染女性人群宫颈病变多处于发病早期，通过筛查进行适当的干预和治疗可阻止其向宫颈癌转变。

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R711．74

B

1671－7783（2014）06－0525－04

10．13312／j．issn．1671-7783．y140221

镇江市社会发展计划项目（SH2013098）

2014－07－28 ［编辑］ 陈海林