朱 鹏，张小飞，徐延伟，尹秀凤

（1.安徽农业大学动物科技学院，合肥 230036；2.南京天邦生物科技有限公司 生物技术研究所，南京 211102）

猪圆环病毒2 型Cap蛋白表达及免疫原性鉴定

朱 鹏1,2，张小飞2，徐延伟2，尹秀凤2

（1.安徽农业大学动物科技学院，合肥 230036；2.南京天邦生物科技有限公司 生物技术研究所，南京 211102）

以猪圆环病毒2型 (Porcine circovirus type 2，PCV2) WH 株基因组 DNA 为模板，扩增 ORF2 截短基因，经BamH I /Not I 双酶切处理后与经相同酶切处理的 pET32a (+) 原核表达载体连接，获得重组质粒 pET32a-Cap2。将重组质粒转化至 BL21（DE3），经IPTG诱导，对表达产物进行 SDS-PAGE 和 Western blot分析。纯化的重组蛋白免疫小鼠，并对获得的血清进行间接 ELISA检测和中和活性测定。SDS-PAGE分析表明，ORF2 截短基因在大肠杆菌中得到表达，蛋白分子质量大小为40 kDa，重组 PCV2 Cap 蛋白主要以上清的形式存在。Western blot证实重组蛋白能够识别抗 PCV2 阳性血清。经间接ELISA 检测，鼠抗PCV2 Cap 血清抗体效价能达到1:25 600，间接免疫荧光检测分析表明，鼠抗PCV2 Cap血清能特异性识别PCV2感染细胞中的Cap蛋白。病毒血清中和实验证实，抗PCV2 Cap血清抗体具有中和病毒的活性，中和效价为1:36。猪圆环病毒2型 Cap 蛋白的表达，为进一步研究该蛋白的功能及Cap 蛋白亚单位疫苗和检测试剂盒的制备奠定了基础。

猪圆环病毒2型 ；Cap 蛋白；免疫原性；中和活性

猪圆环病毒（Porcine circovirus，PCV）为圆环病毒科圆环病毒属成员，由 Tischer 于1974年首先在 PK-15细胞中发现，并于1982年命名为猪圆环病毒。PCV 有2种血清型，即 PCV1和 PCV2[1]。PCV1无或对猪的致病性低，广泛存在猪体内和猪肾传代细胞系中；PCV2 有致病性，是引发猪断奶后多系统衰弱综合征（postweaning multisystemic wasting syndrome，PMWS）的主要病原[2]，主要侵害机体的免疫系统，造成机体的免疫抑制[3]。……