殷秀辰，哈 卓，李 星，张清真，刘惠莉

（1. 上海市农业科学院畜牧兽医研究所 上海市农业遗传育种重点实验室，上海 201106；2. 上海佳牧生物制品有限公司，上海 201106）

含粘膜佐剂的鸡新城疫疫苗诱导雏鸡非特异性免疫应答的研究

殷秀辰1,2，哈 卓1，李 星1，张清真1，刘惠莉1,2

（1. 上海市农业科学院畜牧兽医研究所 上海市农业遗传育种重点实验室，上海 201106；2. 上海佳牧生物制品有限公司，上海 201106）

为研究分析重组大肠杆菌不耐热肠毒素（labile enterotoxin，LT）作为粘膜佐剂，配伍鸡新城疫疫苗的冻干样品对免疫鸡非特异性免疫应答的影响，在前期已经构建的LTR72/G192基础上，选择2、4 μg LTRG蛋白作为每羽份疫苗添加量，及降低新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV） 50%抗原量等配伍条件。按照生产条件制备冻干疫苗，进行雏鸡免疫试验，免疫后24、48、72 h采集脾脏、胸腺淋巴结，检测几种非特异性细胞因子表达水平。结果表明：IL-6、INF-γ水平在各疫苗免疫后24 h即升高，48 h达最高值；添加2、4 μg LTRG蛋白的NDV疫苗组IFN-β、TNF-α水平在48 h左右显著升高，其中含4 μg LTRG疫苗组与其他组差异具有极显著统计学意义（P＜0.01）；IL-6、IFN-γ转录水平有所增强，但各组间差异不具有显著统计学意义（P＞0.05），72 h左右几种细胞因子水平均迅速下降，与NDV疫苗接种组相近。由此可见，LTRG能辅助抗原诱导免疫雏鸡的非特异性免疫应答，有利于对感染病毒的清除。

LTRG；新城疫病毒；佐剂；细胞因子

大肠杆菌不耐热肠毒素（labile enterotoxin，LT）是产肠毒素大肠杆菌分泌的一种毒素蛋白，被认为是最具潜力的黏膜佐剂[1-3]。但LT的毒性限制了其应用，采用点突变可获得减毒甚至无毒的LT突变体，从而制备无毒LT蛋白[4]。……