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(青岛大学医学院第二附属医院肿瘤科，山东 青岛 266042)

乳癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，在我国发病率逐年升高，且呈年轻化趋势。BRYAN等[1]于2006年首次明确提出三阴性乳癌(TNBC)的概念，即雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体(HER-2)均为阴性的一种乳癌亚型。这类乳癌具有发病年龄早、侵袭程度高、容易局部复发和远处转移等特点，不能从内分泌及靶向治疗中获益，病人5年生存率低，预后较差。近年来，雄激素受体(AR)、增殖细胞核抗原(Ki-67)在乳癌发生发展中的作用受到广泛关注，但对其预后意义仍不十分明确。本文旨在探讨AR、Ki-67在TNBC中的表达及临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2011年1月—2012年12月，我院行保乳根治术或改良根治术的乳癌病人共120例，病理类型均为浸润性导管癌。其中经术后病理及免疫组化诊断为TNBC的病人60例，均为女性，年龄34～79岁，平均52岁，术前均未行新辅助放化疗及内分泌治疗。非三阴性乳癌(NTNBC)病人60例，均为女性，年龄35～73岁，平均50岁，ER、PR、HER-2中至少有一项指标为阳性。均为完整石蜡包埋标本，所有病理诊断及组织学分级均至少由两名中级以上职称病理医生确诊。

1.2 免疫组化检测及结果判定

所有试剂均购自北京中杉金桥公司。应用免疫组化S-P二步染色法检测乳癌组织中AR、Ki-67的表达，参照试剂盒说明书进行操作，并选取已知阳性组织切片作为阳性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照。①AR结果判定标准：以细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性表达，无阳性细胞或阳性细胞数<10%为(-)；阳性细胞数10%～25%为(+)；阳性细胞数26%～50%为()；阳性细胞数>50%为()。以(-)为阴性、(+)、()及()为阳性进行研究。②Ki-67结果判定标准：以肿瘤细胞核棕黄染色为阳性表达，无阳性细胞或阳性细胞数<5%为(-)；阳性细胞数6%～25%为(+)；阳性细胞数26%～50%为()；阳性细胞数>50%为()。以(-)及(+)为阴性、()及()为阳性进行研究。

1.3 统计学处理

采用SPSS 17.0统计学软件进行χ2检验和Spearman相关性检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 AR表达

AR在TNBC中的阳性表达率为26.67%(16/60)，在NTNBC中的阳性表达为80.00%(48/60)，二者差异有统计学意义(χ2=34.286,P<0.01)。TNBC病人AR表达与体质量指数(BMI)、淋巴结转移及绝经状态有关(χ2=4.972～10.774,P<0.05)，与年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。见表1。

2.2 Ki-67表达

Ki-67在TNBC组织中的阳性表达率为71.67%(43/60)，在NTNBC组织中的阳性表达率为26.67%(16/60)，二者差异有统计学意义(χ2=24.307,P<0.01)。TNBC病人Ki-67表达与淋巴结转移及组织学分级有关(χ2=4.213、9.492,P<0.05)，与年龄、肿瘤大小及BMI无关(P>0.05)。见表2。

2.3 TNBC病人AR与Ki-67表达的关系

TNBC病人AR与Ki-67表达存在正相关(r=0.246，P<0.05)。见表3。

3 讨 论

乳癌是一群异质性肿瘤，其生物学行为、对治疗的反应及转归都与其他肿瘤不同，并表现为激素依赖性。多项研究表明，乳癌发病率的增加与长期暴露在较高的性激素，尤其是雌激素的环境下有关。在生物学指标中ER、PR、HER-2是比较有价值的可以预测治疗反应的指标，ER、PR也可作为乳癌的独立预后因子。TNBC作为乳癌的一种特殊亚型，其发病年龄早、侵袭性高、易复发转移、生存率低且缺乏有效的治疗手段，不能从内分泌及靶向治疗中获益[2]。

表1 TNBC病人AR表达与临床病理特征的关系(例)

表2 TNBC病人Ki-67表达与临床病理特征的关系(例)

表3 TNBC病人AR与Ki-67表达的关系(例)

然而，值得注意的是，雄激素作为性激素的一种，广泛存在于人体，特别是绝经后女性，雌激素大量减少，而雄激素水平没有明显变化，或者仅有少量下降。雄激素在一般情况下与靶器官上的AR结合后才能发挥作用，雌激素在诱导乳癌中是主要致癌因子，而研究显示AR及其配体雄激素在乳癌的发生发展过程中具有重要作用[3]。雄激素可直接或与雌激素协同作用刺激乳癌细胞的增生，也可转化为雌激素而发挥作用。AR是一种配体依赖性反式转录调节蛋白，在正常细胞及肿瘤细胞均有表达，主要存在于靶细胞的细胞核内。AR在TNBC中具有一定的表达率[4]。目前相关文献表明，AR在乳癌中的表达率为35%～90%[5]。

本文结果显示，AR在TNBC中低表达，与多数研究结果一致。TNBC病人AR的表达与病人的年龄、组织学分级及肿瘤大小无关。AR的表达与绝经状态有关，绝经后的TNBC病人AR表达率更高。AR的表达与BMI有关，在TNBC病人中肥胖者的AR阳性表达率更高。肥胖病人体内脂肪能促进雄烯二醇转化为雌激素，导致血液中游离的雌激素水平增高，从而刺激TNBC癌细胞的增生。同时，TNBC病人中发生淋巴结转移者AR表达率较高，与未发生淋巴结转移者相比差异有统计学意义。淋巴结转移数目是TNBC预后的独立影响因子，表明AR阳性的TNBC淋巴结转移率高，具有高侵袭性，预后较差。

Ki-67抗原是位于第10号染色体上与增殖相关的蛋白，主要与细胞合成代谢有关，其表达能反映肿瘤的增殖活性，是一种公认的细胞增殖活性标志物[6]。在增生细胞的G1、S、G2、M期表达，细胞有丝分裂后该蛋白含量迅速减少，在G0期不表达。Ki-67被认为与细胞的有丝分裂密切相关，是维持细胞周期的必需物质。研究表明，在多种实体恶性肿瘤中Ki-67的表达远高于正常组织，Ki-67的表达亦与乳癌发生、发展及预后有关，它能促进乳癌细胞的增殖、浸润和转移，是一种不良预后因子，可作为早期识别具有高浸润和转移潜能的乳癌及判断其预后有重要价值的指标。已有研究显示，Ki-67表达与乳癌分化、淋巴结转移和预后密切相关[7]。

本文结果显示，TNBC中Ki-67有着明显的过表达，这与国外有关研究结果一致[8]。证明TNBC较易发生复发和转移，预后相对较差。在TNBC中Ki-67的表达与病人年龄、绝经状态、BMI及肿瘤大小无关。在TNBC中Ki-67的表达与淋巴结转移有关，Ki-67阳性高表达提示细胞增殖活跃，肿瘤组织生长快，易发生淋巴结转移，预后较差。组织学分级是判断肿瘤恶性程度高低的一个重要指标，本文结果显示，Ⅰ-Ⅱ级肿瘤Ki-67的阳性表达率显著低于Ⅲ级肿瘤，差异有统计学意义，说明肿瘤恶性程度越高、组织学分级越低其Ki-67的表达越高。

本文结果还显示，AR与Ki-67在TNBC中的表达呈正相关。提示Ki-67与AR在TNBC的发生、发展中具有协同作用，二者联合检测更有助于为TNBC的临床治疗及预后判断提供依据。

总之，TNBC具有AR低表达、Ki-67高表达的现象，提示TNBC有较高的侵袭性，其生物学行为差、预后差，AR、Ki-67有望成为TNBC新的预后指标，也会为预测TNBC临床及生物学特点及内分泌治疗提供重要依据和新的研究方向。

[参考文献]

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