郭奕惠 范嗣刚 黄桂菊 朱克诚 喻达辉

（中国水产科学研究院南海水产研究所 农业部南海渔业资源开发利用重点实验室， 广州 510300）

红罗非鱼MyoD基因克隆及序列分析

郭奕惠 范嗣刚 黄桂菊 朱克诚 喻达辉

（中国水产科学研究院南海水产研究所 农业部南海渔业资源开发利用重点实验室， 广州 510300）

MyoD基因是MRFs家族中的一员，能调控肌肉细胞活性和增殖，在肌肉形成过程中起正调控作用。采用同源基因克隆和RACE方法获得红罗非鱼MyoD基因的cDNA序列。开放阅读框长903 bp，编码300个氨基酸，其中第1-114个氨基酸为碱性结构（Basic domain），第109-165个氨基酸为螺旋-环-螺旋结构（Helix-Loop-Helix domain），第199-213个氨基酸为周期蛋白依赖性蛋白激酶4（CDK4）结合区域，第233-249为Helix III结构，无信号肽序列。MyoD蛋白的二级结构为螺旋-环-螺旋二聚体。基于MyoD构建的鱼类系统进化树显示红罗非鱼，尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼聚为一支。

MyoD 序列分析 克隆 罗非鱼

红罗非鱼（Oreochromis sp.）体呈粉红色，是莫桑比克罗非鱼（O. mossambicus）×尼罗罗非鱼（O. niloticus）杂交产生的后代。红罗非鱼生长速度快，产量高、肉味鲜美，经济效益好，在两广地区可常年养殖，深受养殖户和消费者喜爱。

大多数鱼类可食性部分主要是肌肉。提高肌肉生长速度能短时间内增加鱼的产量，从而增加收益。在分子水平上，鱼类肌肉生长受生肌调节因子MRFs家族（Myogenic regulatory factors，MRFs）调控。MRFs家族基因均具有保守的碱性螺旋-环-螺旋结构域（Basic helix-loop-helix，bHLH），该结构域能与E12和E47等蛋白结合形成二聚体复合物，进而与E-box（CANNTG）结合，从而激活肌肉特异性转录本［1-3］。

MyoD基因（Myogenic differentiation antigen），是MRFs家族中的一员，能调控肌肉细胞活性和增殖，在肌肉形成过程中起正调控作用，缺失后导致成肌细胞无法进行增殖和分化。……