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斑点叉尾鮰巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因多态性及表达分析

2014-03-21高磊杜小溪李乐高祥刚鲍相渤赫崇波

生物技术通报 2014年10期

高磊杜小溪李乐高祥刚鲍相渤赫崇波

(1. 辽宁省海洋水产科学研究院 辽宁省海洋水产分子生物学重点实验室,大连 116023;2. 辽宁师范大学生命科学学院,大连 116029)

斑点叉尾鮰巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因多态性及表达分析

高磊1杜小溪2李乐2高祥刚1鲍相渤1赫崇波1

(1. 辽宁省海洋水产科学研究院 辽宁省海洋水产分子生物学重点实验室,大连 116023;2. 辽宁师范大学生命科学学院,大连 116029)

巨噬细胞移动抑制因子(MIF)是一类主要由T细胞产生、负责机体在环境协迫和炎症反应中进行免疫应答的细胞因子。根据斑点叉尾鮰MIF基因EST序列,应用RACE技术克隆了MIF 3' UTR和5' UTR序列,利用Genome Walking技术克隆了MIF启动子序列,通过特异PCR克隆MIF内含子序列,并对多个体MIF基因组序列进行多态性分析,利用荧光定量PCR研究MIF的组织分布。结果显示,斑点叉尾鮰MIF基因组序列共3 918 bp,其中编码区348 bp,编码115个氨基酸,5'UTR为70 bp,3'UTR为434 bp,启动子为1 382 bp,共有2个内含子,分别为243 bp和1 441 bp。MIF基因组序列中包含4个重复单元序列和60个多态性位点,其中共有6个SNP位于转录因子结合位点上。斑点叉尾鮰MIF mRNA在肠中表达量最高,肌肉中表达量最低。

斑点叉尾鮰 巨噬细胞移动抑制因子(MIF) 基因组序列 多态性 组织表达

巨噬细胞移动抑制因子(MIF)是在1966年被发现的一类高度保守的细胞因子[1,2]。MIF主要由T细胞产生,负责机体在环境协迫和炎症反应中进行免疫应答反应[3,4]。最近MIF被证实在免疫刺激、组织损伤以及细胞应激等过程中具有特异目的细胞的多效性,同时在内皮细胞、脑垂体细胞和特殊上皮细胞等非免疫细胞中分泌[5,6]。……

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