人TLR2基因启动子活性的研究

2014-03-21李苗罗恩杰

中国医科大学学报 2014年6期

关键词：检测

李苗，罗恩杰

（中国医科大学基础医学院病原生物学教研室，沈阳110001）

人TLR2基因启动子活性的研究

李苗，罗恩杰

（中国医科大学基础医学院病原生物学教研室，沈阳110001）

目的鉴定TLR2启动子结构，探索调控TLR2基因高水平转录的启动片段。方法利用生物信息学软件分析TLR2基因启动子结构，构建TLR2启动子序列系列截短的萤光素酶报告基因重组体，脂质体法转染分化成熟的U937细胞，应用双荧光素酶活性检测系统检测启动子的活性。结果-403～+20 bp和-190～+20 bp具有高转录活性，-140～+20 bp和-88～+20 bp启动子活性最低。结论人TLR2基因-190～-140 bp是主要的转录调控区，是进一步研究DNA结合蛋白的调控靶序列。

TLR2基因；转录；启动子

Toll样受体（Toll-like receptor，TLR）2是目前研究认为与免疫及炎性反应关系最为密切的TLR家族成员。TLR2具有相对广泛的配体特异性，可识别多种病原体相关分子模式，如革兰阳性菌肽聚糖、脂胞壁酸、脂蛋白，还包括某些病毒、螺旋体属、支原体属及分支杆菌属微生物等的病原体［1］。TLR2不但具有促进细胞因子的合成与释放、促进免疫细胞成熟、分化和功能化等作用，还在调节机体对入侵病原体的免疫应答水平方面有不容忽视的作用［2～4］。目前，对于TLR2的研究主要集中在其功能方面，而TLR2基因的启动子结构及上游调控因子尚不十分明确。本研究拟对TLR2基因上游5′侧翼区-403～+20 bp的片段进行启动调控活性分析，寻找调控人TLR2基因高启动活性片段，为阐明TLR2基因的转录调节机制奠定分子基础。