低强度脉冲超声促进不同接种密度骨髓间充质干细胞增殖的实验研究
2014-03-21于海生王宁
于海生,王宁
(1.重钢总医院超声科,重庆400084;2.重庆市肿瘤医院超声科,重庆400030)
低强度脉冲超声促进不同接种密度骨髓间充质干细胞增殖的实验研究
于海生1,王宁2
(1.重钢总医院超声科,重庆400084;2.重庆市肿瘤医院超声科,重庆400030)
目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖的可行性及筛选骨髓间充质干细胞适宜的接种密度。方法选取体外培养第3代兔骨髓间充质干细胞接种至20块6孔板,接种密度分别为4×103/mL,1×104/mL,2×104/mL,4×104/mL,8×104/mL。选用频率0.6 MHz,强度为0.2 W/cm2的LIPUS每天分别辐照10 min。辐照前、辐照1 d、2 d、3 d、4 d、4 d后观察细胞生长情况。MTT法检测LIPUS辐照后各密度组细胞增殖活性并绘制OD值曲线。结果BMSCs经过LIPUS辐照后,较空白对照组细胞集落更为密集,细胞分裂增殖活性明显活跃。其中以接种密度为2×104/mL辐照后BMSCs增殖活性曲线更加稳定,细胞增殖活性明显高于空白对照组(P<0.04)。结论LIPUS辐照一定时间后能够促进BMSCs增殖,不同的接种密度的骨髓间充质干细胞增殖活性不一,其中接种密度为2×104/mL细胞增殖活性曲线更加稳定,为更加适宜的接种密度。
低强度脉冲超声;骨髓间充质干细胞;细胞接种密度;细胞增殖
目前骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCS)体外培养增殖速度慢,培养条件复杂,使其在组织工程学和医学细胞增殖治疗学发展受到很大限制[1],同时细胞培养接种密度及生长空间对细胞生长有很大影响作用。因此寻找一种安全高效的技术手段和选择适宜的接种密度对体外扩增BMSCs增殖越来越重要。低强度脉冲超声具有促进细胞快速增殖生物学特殊作用使其应用越来越受到重视[2]。……
