猪胎儿成纤维细胞的分离与基因转染

2014-03-13于永生罗晓彤张立春金海国王晓阳

雷达科学与技术 2014年4期

于永生，曹阳，罗晓彤，张立春，金海国，王晓阳

(吉林省农科院畜牧分院，吉林公主岭 136100)

中国是世界上养猪规模最大的国家，但猪生产水平远低于欧美养猪发达国家[1]。短期内传统的育种手段很难在猪生产性能方面取得大的进展，转基因动物为猪遗传育种提供了新的技术手段，可大大加速遗传改良的速度，尤其是转基因体细胞核移植技术的出现，为转基因技术在猪改良育种中的应用提供了技术支撑。绿色荧光蛋白（Green-fluorescent protein,GFP）cDNA由 Prasher等在维多利亚水母（Aequorea Victoria）中克隆获得[2]，该蛋白在一定波长的紫外光下呈现绿色荧光，可作为标记蛋白用于生物学研究，尤其是由于可直观表现表达效果，而在转基因动物研究领域中广泛应用[3-6]。

表达GFP的转基因猪由Park等采用核移植方法在2001年获取[7]，随后韩国的2个实验室也分别获取了GFP转基因猪[8-9]。国内东北农业大学刘忠华研究团队于2007年也获得了国内首批GFP转基因猪[10]。

本文利用组织块贴壁法获取猪胎儿成纤维细胞，通过脂质体介导的转基因技术获得了表达绿色荧光蛋白的转基因细胞，为建立利用核移植技术获取转基因猪的技术平台奠定了基础。