王鸣宇，王 斐，臧恒昌，张 惠

（1.山东大学药学院，山东济南250012；2.山东泰邦生物制品有限公司，山东泰安271000；3.北京凯元盛世科技发展有限责任公司，山东济南250012）

·综 述·

人血白蛋白生产及其应用研究进展

王鸣宇1，2，王 斐1，臧恒昌1，张 惠3

（1.山东大学药学院，山东济南250012；2.山东泰邦生物制品有限公司，山东泰安271000；3.北京凯元盛世科技发展有限责任公司，山东济南250012）

人血白蛋白是临床上一种特殊的急救药品，本综述介绍了人血白蛋白的生产以及在医药领域中的应用，展望了人血白蛋白的应用前景及发展趋势，以期为国内相关产品的开发和应用提供思路。

人血白蛋白；生产；应用

人血白蛋白（human albumin）是最早从人血浆中提取并大规模生产应用的血液制品，在临床上有着重要的应用价值［1］。自20世纪40年代进入临床使用，人血白蛋白一直有“救命药”之称，成为一种特殊的临床急救药品。但由于原料的限制和临床上不合理的使用，目前市场上人血白蛋白价格高昂，供不应求。因此，本文将人血白蛋白的生产工艺以及临床应用进行总结，以期为研究者及生产厂家提供理论参考。

1 人血白蛋白的生产现状

目前国内外主要以人源血浆为原料，采用低温乙醇法、层析法、低温乙醇法和层析法相结合的生产工艺进行人血白蛋白的分离纯化［2］。此外，基因重组技术生产白蛋白因能够克服传统法血源供应不足、血液中可能存在病毒等缺陷［3］，现在成为世界范围内人血白蛋白生产研究的重点。以下对各方法的原理及特点进行介绍。

1.1 低温乙醇法 低温乙醇法于1940年由美国哈佛大学医学院的Edwin J.Cohn教授发明，其分离血浆蛋白的原理是［4］：向蛋白质的水溶液中加入乙醇，从而降低水分子的活度，排斥蛋白质周围的水分子，使蛋白质分子间通过极性基团的相互作用在范德华力的作用下发生凝聚而沉淀。浦奕奕［4］结合低温乙醇法的基本原理以及自身的工作经验，对低温乙醇法生产人血白蛋白的原理和生产工艺进行了详细的阐述。作为传统且成熟的生产方式，目前国内的生产企业基本均采用此种方法生产人血白蛋白。

1.2 层析法 为克服低温乙醇法存在操作环境苛刻、产品的纯度不够高、乙醇本身的不安全性等缺点［5］，近年来，层析法被开发应用到人血白蛋白的制备过程中。罗亮等［6］对柱层析法生产人血白蛋白进行了研究，首先采用DEAE－C柱层析法得到白蛋白，然后在68℃条件下加热30 min使杂蛋白变性，达到去除杂蛋白的目的。热变性结合层析色谱法分离提纯白蛋白可以简化生产工艺，提高白蛋白的收率，并有效的降低生产费用。

1.3 低温乙醇法和层析法结合 低温乙醇法和层析法相结合可以保留冷乙醇沉淀病毒灭活的优点，同时在制备过程可以实现完全自动化控制，生产的人血白蛋白纯度高、安全性高。杨海荣等［7］将层析技术与冷乙醇工艺相结合，成功地探索出一条生产人血白蛋白的新路线：首先将冷乙醇沉淀后的血浆上清进行脱盐除乙醇，然后用阳离子交换树脂吸附非白蛋白组分，最后疏水层析处理得到纯度＞99%，收率为81.2%的人血白蛋白制品。

1.4 重组技术 早在1981年Lawn R.M.首次报道了重组白蛋白在大肠杆菌中获得成功表达，此后，各国实验室已在大肠杆菌、枯草杆菌、酵母、植物及转基因动物等成功表达了人血白蛋白。Kobayashi等［8］用毕赤酵母进行表达制备重组白蛋白，产率维持在1.4 g·L－1。Yang He等［9］通过转基因水稻成功制备得到重组人血白蛋白，纯度＞99%，产量为每kg糙米可得到2.75 g重组人血白蛋白。目前，日本绿十字、美国默克、英国Delta公司三家药企掌握制备重组人血白蛋白制剂的技术，在国内，华北制药经过自主开发，能够制备药用辅料级的重组白蛋白，海正药业的重组人血白蛋白制剂及辅料处于临床审批阶段。寻求更好的方法以得到更高质量、更低成本的重组白蛋白依然有着重要的研究价值。

2 人血白蛋白的应用

白蛋白是血浆中含量最高的蛋白质，占血浆总量的50%～60%，在人体内有着重要的生理作用［10］：①增加血容量和维持血浆胶体渗透压；②运输和排毒作用；③内皮稳定作用。正是这些生理作用，人血白蛋白有着重要的临床应用价值。

2.1 在慢性肝病中的应用 人血白蛋白能够显著提高肝硬化及其并发症患者的胶体渗透压，对临床上肝硬化、门静脉高压症、肝腹水等患者有着重要的治疗应用价值。Kwok等［11］采用随机效应荟萃分析的方法对1 518名肝硬化病人进行调查研究，发现治愈伴有感染的肝硬化病人时，人血白蛋白相对其他血容量扩充剂能够更有效的减少病人的死亡率和对肾脏的损伤，并且能够有效降低肝硬化病人因穿刺而引起的循环系统紊乱带来的危险。

2.2 在肾病综合症中的应用 肾病综合征可由多种病因引起，症状包括大量蛋白尿、低蛋白血症、高脂血症和水肿。静注白蛋白可以提高病人的血浆胶体渗透压，同时可以补充白蛋白，缓解低蛋白血症状，因此临床上常和利尿药合并用于肾病综合征的治疗。Ghafari等［12］将尿量和钠外排量作为评价指标，通过对肾病综合征病人的临床治疗发现联合输注呋塞米（利尿药）和白蛋白的临床治疗效果好于单独输注呋塞米的治疗效果。这是因为联合用药后，白蛋白的增加肾小球的滤过率的作用以及呋塞米的利尿作用提高了其治疗效果。

2.3 在脓毒症中的应用 在脓毒症患者中，由于血管收缩舒张功能异常和通透性增加，病人常出现血容量降低、组织器官低灌注状态，因此及时进行有效液体复苏成为脓毒症治疗的关键措施，临床上人血白蛋白常用于脓毒症病人的液体复苏。Finfer等［13］为研究白蛋白在脓毒症液体复苏中的作用，将1 218名重症脓毒症患者分成输注白蛋白组（603名患者）和生理盐水组（615名患者），采用相应的治疗措施，结果表明没有证据显示使用白蛋白能够对肾脏或其他器官的功能造成损伤，白蛋白组的病死率（30.7%）低于生理盐水组的病死率（35.3%）。但是近年来白蛋白用于脓毒症液体复苏的临床治疗的价值却一直存在争议，郑岩等［14］通过对相关文献的查阅与回顾，总结现有研究表明白蛋白用于脓血症的液体复苏是安全、有效的，能够改善患者的低蛋白血症，更好的维持循环系统的稳定，但是缺乏降低病死率的充分证据。2012年《欧洲危重病协会关于危重患者中胶体应用的共识》推荐“人血白蛋白可用于严重脓毒症患者的液体复苏治疗”。

2.4 在溃疡中的应用 白蛋白能改善血液循环，维持血浆胶体渗透压，增加蛋白含量，增加局部组织营养供应，对于溃疡有很好的治愈效果。乐开林等［15］将80例糖尿病足溃疡患者分为治疗组（42例）和对照组（38例），分别采用白蛋白外敷加一般治疗方法和一般治疗方法进行临床治疗，结果表明应用白蛋白治疗糖尿病足溃疡能够加快患者的创面愈合速度，疗效显著且无不良反应。

2.5 在脑部疾病中的应用 人血白蛋白能够迅速提高胶体渗透压，阻止水分向脑损伤区域聚集；能够扩张容量血管，改善脑损区血液循环，消除脑水肿液；可以结合内外源毒性物质，有效稳定机体环境，因此常用于脑部疾病的临床治疗。夏磊等［16］通过临床对照实验研究白蛋白对治疗高压脑出血的疗效影响，结果显示28 d后白蛋白治疗组的患者较对照组和甘油果糖组的患者血肿体积明显减小，血IL－6、TNF－α及MDA含量降低，血SOD活性升高，神经功能缺损评分显著改善，因此采用白蛋白治疗高压脑出血患者能够促进血肿吸收，起到保护神经功能的作用。但是Ginsberg等［17］对841例缺血性脑中风患者的最新研究结果表明，静脉注射25%的人血白蛋白（8 mL·kg－1，体重≥94 kg时静注750 mL）用于患者的临床治疗并不能够产生有效的治疗效果，不能对脑及神经起到保护作用。鉴于此，人血白蛋白对于缺血性脑中风的临床治疗价值还需要进一步的研究，以起到临床治疗的指导作用。

2.6 在危重患者中的应用 目前，随着对白蛋白的临床应用的深入研究，白蛋白在危重患者中的应用受到越来越多的争议［18］。一方面，作为一种优良的复苏液，白蛋白长期被广泛地应用于危重患者的临床治疗。另一方面，有些学者认为与其他复苏液相比，白蛋白用于危重患者的临床治疗并没有降低患者的死亡率和并发症的发生率，加之白蛋白的昂贵价格以及可能出现的副作用等缺点，对白蛋白在危重患者中的临床使用提出了质疑。Liberati等［19］通过对8 452例危重患者的研究发现没有证据表明白蛋白临床治疗能够降低低血容量、烧伤及低蛋白血症患者的死亡率。因此，关于白蛋白在危重患者中的临床应用亟待更全面、深入的研究，以便指导白蛋白在危重患者治疗中的合理应用。

3 结语

随着国家对采血站的整顿和规范、制备工艺的不断优化、新版GMP的强制执行，人血白蛋白产品的质量得到了大大的提升，已经成为最安全的药品之一。同时作为一种临床常用急救药物，需求量巨大，长期供不应求、价格居高不下，传统的人血白蛋白的生产方式已无法满足市场的需求。随着生物技术，特别是基因重组技术的发展，为人血白蛋白的生产提供了新的方法和思路，目前重组人血白蛋白已经在一些国家上市销售并且有着巨大的市场前景。

虽然白蛋白有着重要的临床应用价值，但是关于其使用的合理性和安全性一直饱受争议，特别是在危重患者的急救当中的使用合理性还存在很大的分歧。随着社会的不断进步，人们对于生活质量和生命健康的要求越来越高，因此，医药工作者应该进行更广泛、更深刻的调查研究，形成规范的人血白蛋白的应用指南，使人血白蛋白得到更加合理、有效的利用。

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Research progress on production and application of human album in

WANGMing-yu1，2，WANG Fei1，ZANG Heng-chang1，ZHANG Hui3
（1.School of Pharmaceutical Sciences，Shandong University，Jinan 250012，China；2.Shandong Taibang Biological Products Co.，Ltd.，Taian 271000，China；3.Beijing Kaiyuan Shengshi Sciencce and Technology Development Co.，Ltd.，Jinan 250012，China）

Human albumin is a special clinical rescuemedication.This review introduced the production of human albumin and its application asmedicine.In addition，it also looked ahead at the prospects and trends of human albumin，expecting to provide ideas for the development and application of domestic related products.

Human albumin；Production；Application

R977.6

A

2095－5375（2014）10－0600－003

王鸣宇，男，研究方向：制药工程，E－mail：dayu9681＠163.com

臧恒昌，男，教授，硕士生导师，研究方向：多糖类药物研究、药品生产工艺优化及在线过程分析与过程控制，Tel：0531－88380268，E－mail：zanghcw＠126.com