补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞PI3K/AKT信号转导通路影响的实验研究
2014-02-27刘亚莉易佳丽王莹井欢刘春英
刘亚莉,易佳丽,王莹,井欢,刘春英
(1.辽宁中医药大学基础医学院病理学教研室,沈阳110032:2.辽宁卫生职业技术学院医学技术系卫生检验教研室,沈阳110101)
补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞PI3K/AKT信号转导通路影响的实验研究
刘亚莉1,2,易佳丽1,王莹1,井欢1,刘春英1
(1.辽宁中医药大学基础医学院病理学教研室,沈阳110032:2.辽宁卫生职业技术学院医学技术系卫生检验教研室,沈阳110101)
目的观察补中益气汤含药血清对肺腺癌顺铂耐药细胞A549/DDP的抑制作用,并探讨其对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白和mRNA表达的影响。方法以SD大鼠制备高、中、低剂量的补中益气汤含药血清和空白对照血清。MTT法筛选最佳含药血清组。培养细胞分为空白血清组、最佳含药血清组、LY294002组(阻滞剂组)、最佳含药血清+ LY294002组(联合组)和阴性对照组。免疫细胞化学方法和实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测PI3K、p-AKT蛋白和mRNA的表达情况。结果随着含药血清浓度的升高,对顺铂的逆转倍数不断增加;中剂量含药血清作用48 h为最佳含药血清及最佳作用时间;最佳含药血清可使A549/DDP细胞中PI3K、p-AKT蛋白表达减少,与空白血清组比较差异有统计学意义(P<0.05);补中益气汤诱导A549/DDP细胞PI3K、p-AKT mRNA表达显著减少,与空白血清组比较,差异有统计学意义(P<0.05),与阻滞剂联合作用p-AKT mRNA下降更为明显。结论补中益气汤可通过降低A549/DDP细胞中PI3K、p-AKT mRNA的表达而影响PI3K/AKT信号转导通路,进而发挥对顺铂耐药的增敏作用。
补中益气汤;磷脂酰肌醇3激酶;磷酸化蛋白激酶
随着我国城镇化进程的加快和空气污染、吸烟人群的增多,肺癌的发病率和死亡率有明显增多的趋势。……
