谢小丽

湘潭市湘钢医院，湖南湘潭 411101

目前全球乳腺癌发病率一直呈上升趋势，近年我国乳腺癌发病率的增长速度明显高于发达国家，国内肿瘤登记地区乳腺癌发病率位居女性恶性肿瘤的第1 位。c-Met 蛋白是由c-Met 原癌基因编码的一种蛋白产物，研究显示c-Met 蛋白参与细胞色素细胞信号传导和骨架重塑，其与肿瘤细胞的增殖分化、浸润转移以及血管生长有密切关系[1]。国外有学者研究显示在多种肿瘤的发展和转移过程中，均可见c-Met 蛋白的过度表达和基因扩增[2]。本文笔者选择本院近年收治的乳腺浸润性导管癌患者，采用免疫组化法研究c-Met 蛋白的表达与乳腺癌病理特征的关系，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择本院2008年1月—2013年5月本院乳腺浸润性导管癌患者78例的临床病理标本，全部患者均为女性，年龄31～62岁，平均45.5±3.8岁。其中肿瘤直径＜2 cm 16例，肿瘤直径2～5 cm 54例，肿瘤直径＞5 cm 8例；TNM 分期：Ⅰ期12例，Ⅱ期46例；Ⅲ期16例，Ⅳ期4例；病理分级：Ⅰ级13例，Ⅱ级45例，Ⅲ级20例；出现淋巴转移40例，无淋巴转移38例。

1.2 方法

全部石蜡病理切片首先进行脱蜡及水化处理，微波法修复抗原，室温下滴加抗原修复液10 min，然后滴加正常山羊血清封闭液20 min，甩去多余液体，不洗。然后滴入美国Zymed 公司生产的兔抗人c-Met 多克隆抗体，在37 ℃下孵育30 min 后放入冰箱12 h，设置冰箱温度为4 ℃；然后取出切片复温后，每张切片滴加二抗50μL，在37℃下再次孵育40 min，孵育完成后，洗涤并采用苏木素衬染，最后于显微镜下观察蛋白表达情况。

1.3 观察方法

每张切片选择3 个高倍视野进行肿瘤细胞计数，并统计每张切片的阳性细胞率及阳性细胞染色强度，阳性细胞以胞膜出现棕黄色颗粒状染色为标准。c-Met 蛋白表达情况以阳性细胞百分比及染色强度评分进行判定，具体评分方法参考文献[3]，无色0 分，浅黄1 分，深黄2 分，棕黄色3 分；染色强度评分×阳性细胞百分比结果大于1 为。c-Met 蛋白表达阳性，结果≤1 为c-Met 蛋白表达阴性。

1.4 统计学方法

数据采用Excel2003 录入，以SPSS 17.0 统计学软件进行数据分析，计数资料采用Fisher 确切概率法或Pearson χ2检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

本组78例患者病理标本中，34例c-Met 蛋白阳性，占43.6%。c-Met 蛋白在不同肿瘤大小及病理分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级乳腺癌组织中表达阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）；c-Met 蛋白在有淋巴结转移及TNM 分期Ⅲ—Ⅳ期乳腺癌组织中表达阳性率明显高于无淋巴转移及TNM Ⅰ—Ⅱ期乳腺癌组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。具体见表1。

3 讨论

c-Met 为肝细胞生长因子受体，具有酪氨酸激酶活性，c-Met位于人体七号染色体的长臂上，包含21 各外显子，其中有许多细胞生长调控序列[4]。c-Met 在不同细胞或细胞不同分化阶段其具体功能不同，主要功能有促进肝细胞、内皮细胞的分裂，诱导细胞形态改变，在胚胎发育过程中控制细胞的移动。c-Met 蛋白是由c-Met 原癌基因编码的一种蛋白产物，c-Met 基因及c-Met 蛋白参与调控肿瘤细胞的增殖分化和转移，国外有学者研究显示在多种肿瘤的发展和转移过程中，均可见c-Met 蛋白的过度表达和基因扩增，并且c-Met 蛋白的高表达很可能是c-Met 基因扩增、转录增强的结果[5]。研究显示c-Met 的激活是癌症的发展的一个重要因素，c-Met 主要通过与肝细胞生长因子结合导致自身受体磷酸化，从而激活酪氨酸，进一步导致多种生长因子底物蛋白质酪氨酸磷酸化，促进组织生长；而多种肿瘤组织中c-Met 与肝细胞生长因子均呈现高表达状态，对多种生长因子形成正反馈促进作用，促进肿瘤组织生长和侵袭[6]。

表1 c-Met 蛋白在不同病理特征乳腺癌组织中的表达情况[n（%）]

大量研究显示多种肿瘤组织细胞（如乳腺癌、甲状腺癌、前列腺癌、胃癌、胰腺癌等）的生长与c-Met 的高表达有密切联系[7]；本文中乳腺癌患者c-Met 蛋白阳性表达率为43.6%，并且c-Met 蛋白阳性率与肿瘤大小及病理分级无明显关系，但随着淋巴转移及肿瘤分期的增高，乳腺癌组织中c-Met 蛋白阳性率呈正向升高趋势，证实在乳腺癌中c-Met 表达与肿瘤转移及进展有关，与文献报道相符。鉴于c-Met 在肿瘤发展中的作用，通过干预c-Met 表达来抑制肿瘤患者癌肿转移、复发成为肿瘤研究的新方向。目前已近有学者研究证实通过miR-340 靶向抑制c-Met 可抑制乳腺癌细胞的迁移和侵犯[8]，但是其在改善患者生存率方面的效果还需要进一步研究

综上所述，本研究提示，c-Met 蛋白的表达在乳腺癌的侵袭和转移中有重要作用，提示临床通过检测或干预c-Met 蛋白表达来判断乳腺的发生、发展和患者预后情况，也为乳腺癌治疗提供了新的方向。

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