刘承军王海丽王芸

（1.聊城市畜牧兽医局，山东 聊城 252000；聊城职业技术学院）

高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗与灭活苗免疫效果评估

刘承军1王海丽2王芸1

（1.聊城市畜牧兽医局，山东 聊城 252000；聊城职业技术学院）

高致病性猪蓝耳病又称“猪繁殖与呼吸综合症（PRRS）”，是在编码Nsp2的基因上发生缺失变异毒株引起的一种猪只死亡率高、造成损失巨大的烈性传染病。该病病毒致病性强，传播迅速，可以致使猪大批死亡，尤其以仔猪最为明显。为进一步做好高致病性猪蓝耳病防控工作，科学制定免疫程序，避免该病的发生和蔓延，笔者在某大型养猪企业饲养的35日龄的仔猪中进行了高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗与灭活苗免疫效果对比实验，并根据农业部规定的《2014年高致病性猪蓝耳病监测方案》中制定的标准对使用不同疫苗的仔猪抗体水平进行跟踪监测，摸清两种不同疫苗抗体产生的规律，分析制约免疫抗体水平的主要原因，为合理选择疫苗类型和制定免疫方式及免疫时间等提供科学依据。

1 试验材料

1.1试验动物

在同一目标猪场的同舍选择同一日龄（35日龄）、相同批次、体形和体重基本相同的同品种仔猪160头，所有试验仔猪均没有注射过任何猪蓝耳病（PRRS）疫苗。

1.2疫苗

分别选取国内4家在山东省重大动物疫病中标疫苗厂家提供的高致病猪蓝耳弱毒苗和灭活苗，4家企业弱毒苗的标号分别用A、B、C、D表示，4家企业灭活苗标号分别为E、F、G、H表示。所有分组严格根据疫苗说明书指定的要求进行储藏和使用。

1.3检测所用试剂盒

使用猪繁殖与呼吸综合征检测试剂盒，法国LSI，批号为2－TTVETPRA－40。

2 试验方法

2.1试验动物随机分组

160头猪共分8组，平均每组20头。使用A、B、C、D四组弱毒活疫苗对其中4组仔猪在35日龄进行免疫注射1次，剂量1头份/头。使用E、F、G、H四组疫苗对剩余的4组仔猪分别在35日龄首免，65日龄二免疫，均为2mL/头。

2.2临床观察

组织人员对注射疫苗后猪的表现状况进行观察，并详细记录，其中,猪只的饮食状况、精神状况、有无免疫副反应等项目是观察记录的重点。

2.3样品采集

血液样品主要在仔猪免疫日、63日龄、93日龄血样，并对全血进行血清分离后低温保存。

2.4抗体检测及结果判定

完全按照LSI猪繁殖与呼吸综合征检测试剂盒所提供的说明书操作步骤和注意事项进行操作。8组试验猪使用两种疫苗免疫后的抗体全部使用间接ELISA检测。免疫抗体效价用IPRC值表示，IPRC=［(样品OD450－阴性对照平均值OD450)/(阳性对照平均值OD450－阴性对照平均值OD450)］×100。当IPRC＞20，样品为阳性，当IPRC值≤20，样品为阴性。

3 结果

3.1弱毒活疫苗免疫抗体水平情况

A、B、C、D四组免疫首次免疫当日仔猪母源平均IRPC都处于40以下的水平。首免后28日（63日龄），4组平均IRPC都稳步提升，首免后58日（93日龄），A、B组平均IRPC仍处于上升的水平，但是C、D组的平均IRPC却呈下降态势。（见表1）

表1 A、B、C、D组IRPC变化

使用弱毒活苗的4个试验组的猪抗体合格率在免疫后均呈现上升的趋势，4个实验组在35日龄（首免当日）抗体水平合格率处于9%～41%，首免28日后，免疫抗体合格率处于90.10%～100%；首免58 d后，C、D两组的免疫抗体合格率达到100%，B组抗体合格率98.30%，A组抗体合格率仅为92.18%。（见表2）

表2 用弱毒苗后A、B、C、D组抗体合格率%

3.2灭活疫苗免疫抗体水平情况

E、F、G、H四组免疫首次免疫当日仔猪母源平均IRPC值都处于26以下的水平。65日龄时（首免后30d），4个实验组平均IRPC都稳步提升且提升幅度非常明显，95日龄（首免后60日），4个试验组的平均IRPC仍处于升高的水平，其中以G组最明显，水平最高，E组最低。（见表3）

表3 用灭活苗后E、F、G、H组IRPC变化

使用灭活苗的4个实验组的猪抗体合格率在首免后同样都呈现上升的趋势，4个试验组在35日龄（首免当日）抗体水平合格率处于12%～28%，首免28d后，免疫抗体合格率处于35.80%～50.10%；首免58d后，抗体合格率处于70.96%～75.26%。（见表4）

表4 用灭活苗后E、F、G、H组抗体合格率%

3.3免疫副反应观察记录

猪蓝耳病弱毒活疫苗免疫后，没有发现明显的副反应症状。灭活疫苗免疫后，部分猪出现精神沉郁、采食下降等副反应症状，个别猪体温稍有升高，但很快恢复正常。

4 讨论

4.1两种疫苗效果比较

通过试验可以发现，两种疫苗在首免后60 d时，8组猪的平均抗体水平全部能够达到国家规定的“免疫抗体合格率全年保持在70%以上”的基本要求。但通过表2、表3数据我们发现，使用弱毒活苗的猪抗体合格率全部在92.18%以上，比使用灭活苗的4组试验中任何一组的抗体合格率都要高，这是表明弱毒活苗免疫效果明显优于灭活苗的证据之一。其次，弱毒疫苗使猪只产生抗体的速度要明显比灭活苗快，突出表现在，使用弱毒疫苗首免后28日，4组试验组的抗体水平均在90.11%以上，部分试验组抗体水平达到了100%，但是使用灭活疫苗首免后58日的4组试验组的抗体水平均低于50.1%。通过对两种疫苗需要试验数据进行分析发现，猪蓝耳病弱毒活疫苗只需要免疫一次（1头份/头）就可以达到比较高的免疫抗体合格率；但是，灭活苗必须免疫两次才能达到国家要求的抗体水平（70%以上）。究其原因应该是两种疫苗的免疫机制有差异，弱毒苗能够同时诱导体液免疫和细胞免疫，灭活苗只能诱导产生体液免疫，免疫效果明显差于弱毒苗。

4.2关于疫苗的选择

猪场应该根据周边地区猪蓝耳病流行的毒株选择疫苗种类，严防因疫苗选择不当，不能形成有效保护，造成疫病发生。其中弱毒灭活苗因具有安

全性好、副反应低、免疫应答好、临床使用效果好等优点，可以在接种后21～28日产生免疫力，免疫期为4个月，所以在猪蓝耳病的地区应该首先考虑使用弱毒活疫苗。另外，一个猪场只能选择一种毒株的疫苗使用，严禁多种毒株疫苗同时使用，严防病毒毒株重组，导致毒力增加；一旦近距离有猪蓝耳病疫情，也要选择使用弱毒活疫苗，防止疫情传入。对于种猪场、受该病疫情威胁不大猪场可以选择使用灭活苗，达到净化该病的目的。

4.4综合防控措施

4.4.1做好免疫工作。免疫是预防该病发生的最有效的手段，广大养殖场户可以根据周围疫情形势合理选择疫苗，科学制定免疫程序，严格规范免疫操作规程，严禁违规操作，要做好该病的监测工作，不断提高检测频率和效率，及早了解疫情和抗体发展规律，提前做好预防工作，同时，要做好猪瘟、猪圆环病毒、猪伪狂犬病等疫病的免疫工作。

4.1.2落实生物安全措施。一是要前移控制关口，不断加大消毒力度，科学选择消毒药品，强化对场内、舍内以及带猪消毒的力度，做好运输环节的消毒，

严格消毒程序，严防疫病传入；二是要落实全进全出的饲养制度，进一步优化饲养环境，尽量减少猪只应激反应，如免疫、转群、气温突变等；三是要加强人员管理，量化考核，增强责任意识，不断提高人员管理水平和饲养水平；四是建立无害化处理机制，做好病死猪无害化处理工作，严防疫病的传播。

4.1.3药物预防措施。为防止继发感染，可在饲料中或饮水中添加药物预防因各类细菌病以及寄生虫的发生降低机体抵抗力，诱发该病发生。

4.1.4严防因引种导致病原传入。加强引进猪只的病原学和血清学检测，建立隔离饲养制度。

[1]杨俊.湖南夏季规模猪场高致病性猪蓝耳病风险评估及综合防控措施[J].中国猪业，2011（11）：18～19.

[2]刘承军.高致病性猪蓝耳病流行特点及综合防控策略的研究[J].中国动物保健，2014（1）：38～40.

[3]秦学远.高致病性猪蓝耳病灭活苗和弱毒疫苗免疫效果试验[J].黑龙江畜牧兽医，2014（01）：61～63.

[4]田克恭.高致病性猪蓝耳病流行现状与免疫防控进展[J].中国猪业，2010（6）：9～11.

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1004-2342（2014）06-0058-03

S855.3

C

2014-09-28）

山东省高等学校科技计划项目（项目编号：J14LF56）