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Hippo 信号通路作用分子 TAZ 在人骨肉瘤及骨肉瘤干细胞中的表达

2014-02-13朱忠胜张春林汪泱

中国骨与关节杂志 2014年2期
关键词:血清检测

朱忠胜 张春林 汪泱

Hippo 信号通路作用分子 TAZ 在人骨肉瘤及骨肉瘤干细胞中的表达

朱忠胜 张春林 汪泱

目的检测在人骨肉瘤组织、骨肉瘤 MG63 细胞及其干细胞中 Hippo 信号分子 TAZ 的表达情况,比较骨肉瘤细胞和骨肉瘤干细胞中 TAZ 的表达差异,并探讨其可能的临床意义。方法2010 年 1 月至2012 年 1 月在我院治疗的骨肉瘤患者中,选取原发骨肉瘤组织标本 12 例,复发的骨肉瘤标本 6 例,另选 6 例骨纤维结构不良组织作阴性对照,并贴壁培养骨肉瘤 MG63 细胞,采用免疫组化方法检测骨肉瘤组织和骨肉瘤MG63 细胞中 TAZ 的表达情况;用无血清悬浮培养骨肉瘤 MG63 细胞,分离并收集骨肉瘤细胞球,通过定量反转录-聚合酶链反应 ( RT-PCR ) 法检测骨肉瘤 MG63 细胞及骨肉瘤细胞球中胚胎干细胞标志基因 ( Nanog,Oct4 ) 和 Hippo 信号分子 TAZ 的表达,Western 印记法检测 MG63 细胞和细胞球中 TAZ 蛋白的表达情况。结果在 12 例人骨肉瘤原发组织标本中,3 例骨肉瘤组织 TAZ 表达阳性,而 6 例骨肉瘤复发组织中 TAZ 表达全部阳性,在骨肉瘤细胞 MG63 中 TAZ 分子表达也呈阳性,而骨纤维结果不良中全部表达阴性。与骨肉瘤MG63 细胞相比,RT-PCR 显示培养的骨肉瘤细胞球中干细胞标志基因 Nanog,Oct4 和 Hippo 信号分子 TAZ 明显高表达。Western blot 提示细胞球中 TAZ 蛋白表达明显高于骨肉瘤 MG63 细胞。结论骨肉瘤组织中存在TAZ 分子的表达,在复发骨肉瘤组织中呈高表达;在骨肉瘤细胞株中也存在 TAZ 分子的表达,而在干细胞中TAZ 分子表达更高;提示其与骨肉瘤干细胞的特征具有一定的相关性。

骨肉瘤;肿瘤干细胞;Hippo 信号通路;……

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