2009年至2012年临床细菌分布与耐药变迁

2014-02-07曹小秋刘春霞

实验与检验医学 2014年4期

关键词：西林埃希菌葡萄球菌

曹小秋，刘春霞

(南通瑞慈医院检验科，江苏南通226010)

2009年至2012年临床细菌分布与耐药变迁

曹小秋，刘春霞

(南通瑞慈医院检验科，江苏南通226010)

目的了解南通瑞慈医院2009年-2012年临床常见细菌分布及耐药变迁，为临床疾病诊断和合理使用抗菌药物提供依据。方法共收集南通瑞慈医院2009年1月-2012年12月2795份非重复的细菌，用纸片扩散或MIC法进行药敏试验，参照2010版美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准判断药敏结果,分析采用WHONET 5.6软件进行数据分析。结果2795株非重复样本中细菌分布为：革兰阴性杆菌(57.57%)、革兰阳性球菌(31.84%)、真菌(9.02%)；痰液中检出最高，其前5位病菌为：凝固酶阴性葡萄球菌(16.67%)、大肠埃希菌(14.28%)、铜绿假单胞菌(10.98%)、肺炎克雷伯菌(8.69%)、金黄色葡萄球菌(8.55%)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为47.5%，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)为85%，葡萄球菌对苯唑西林、复方新诺明、庆大霉素耐药呈逐年增加趋势。超广谱β－内酰胺酶(ESBLs)的检出率为：大肠埃希菌(49.4%)，肺炎克雷伯菌(21.1%)，肠杆菌科耐药变迁趋势不明显。非发酵菌耐药率呈总体上升趋势，对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦耐药率上升最显著。结论医院感染病原菌耐药性日趋严重，加强细菌耐药性监测，及时掌握细菌耐药性变迁动态，对指导临床合理使用抗生素和控制多重耐药菌院内感染有重要意义。

细菌培养；耐药性；变迁

为了解我院感染性疾病细菌构成和耐药性变迁,为临床合理使用抗菌药物提供依据,对我院2009年1月-2012年12月临床送检标本分离出的2795株细菌及其对常用抗生素的耐药性进行回顾性统计分析,现报告如下。

1 材料与方法

1.1 菌株来源共收集2009年1月-2012年12月我院门诊及住院患者2795株非重复细菌。

1.2 试剂与仪器法国生物梅里埃公司ATB-expression细菌鉴定仪及其配套细菌鉴定条和药敏条，哥伦比亚血平板、麦康凯琼脂、沙保罗琼脂及MH培养基、药敏纸片购自英国Oxoid公司。

1.3 细菌培养及鉴定按照《全国临床检验操作规程》第3版进行操作[1]。分离菌株鉴定和药敏试验，用细菌分析仪鉴定,药敏葡萄球菌为MIC法，肠肝菌和非发酵菌为K-B法。根据2010版美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准判断药物敏感性。

1.4 质控菌株大肠埃希菌ATTCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、金黄色葡萄球菌ATCC25923、肺炎克雷伯菌ATCC700603、白念珠菌ATCC90028由江苏省临床检验中心提供。

1.5 统计学分析采用WH0NET5.6软件和SPSS17.0软件进行数据分析。

2 结果

2.1 标本来源分布2795株病原菌在各类标本中的分布为:痰(45.47%)、血(18.46%)、脓液/分泌物(16.74%)、尿液(13.6%)、粪便(3.11%)、各种无菌体液(脑脊液、骨髓液、胸水以及腹水等)2.61%。

2.2 病原菌的分布2795株病原菌中革兰阴性杆菌1609株，占57.57%,其中肠杆菌科细菌949株(33.95%)、非发酵菌660株(23.61%)；革兰阳性球菌890株，占31.84%,其中葡萄球菌705株(25.22%)、链球菌/肠球菌185株(6.62%)；真菌252株(9.02)%。痰液主要病原菌为铜绿假单胞菌(20.61%)、肺炎克雷伯菌(14.63%)、嗜麦芽窄食单胞菌(10.15%)；血液主要病原菌为凝固酶阴性的葡萄球菌(49.81%)、大肠埃希菌(8.33%)、金黄色葡萄球菌(7.95%)；尿液主要病原菌为大肠埃希菌(53.95%)、肺炎克雷伯菌(5.53%)、凝固酶阴性葡萄球菌(5.00%);无菌体液(脑脊液、骨髓液、胸水以及腹水等)主要病原菌为凝固酶阴性葡萄球菌(23.29%)、金黄色葡萄球菌(10.96%)、大肠埃希菌(10.96%)；脓液/分泌物主要病原菌为凝固酶阴性的葡萄球菌(26.92%)金黄色葡萄球菌(25.21%)大肠埃希菌(12.39%)。

2.3 病原菌的耐药性

2.3.1 G+球菌的耐药性临床分离705株葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)114株(47.5%)，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS) 396株(85%)。未发现耐万古霉素、利奈唑烷的葡萄球菌、链球菌、屎肠球菌，见表1。

表1 主要G+球菌对常用抗菌药物的耐药率(%)

2.3.2 G-杆菌的耐药性临床分离949株肠杆菌科中产超广谱β－内酰胺酶的大肠埃希菌197株(49.4%)、产超广谱β－内酰胺酶的肺炎克雷伯菌51株(21.1%)，见表2。

2.3.3 主要病原菌的耐药变迁葡萄球菌的耐药变迁葡萄球菌对苯唑西林，复方新诺明，庆大霉素耐药呈逐年增加趋势，如2009年到2012年间，金黄色葡萄球菌对苯唑西林、复方新诺明和庆大霉素的耐药性分别从24.50%增加到65.70%，19.90%增加到36.80%及20.60%增加81.50%；统计发现MRSA的检出率从2009年24.5%上升到2012年的65.70%，MRCNS的检出率从2009年77.22%上升到2012年的90.98%。

2.3.4 G-杆菌的耐药变迁统计发现肠杆菌科耐药变迁趋势不明显，如2009年到2012年间，大肠埃希菌对复方新诺明的耐药性为63.60%～63.40%之间，对环丙沙星的耐药性为72.84%～60.10%之间，对诺氟沙星的耐药性为62.80%～64.90%之间。另外，统计发现非发酵菌耐药率呈总体上升趋势，其对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦耐药率上升最显著，如，铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药率从2009年14.7%上升到2012年的46.8%，鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药率从2009年9.09%上升到2012年的63.8%。

3 讨论

根据本文统计显示：我院感染以革兰阴性杆菌为主占57.57%，与黄卫春等报道的59.8%[2]相仿，低于胡付品等报道的占71.5%[3]；G+球菌对利奈唑烷、万古霉素敏感性高，葡萄球菌对苯唑西林、复方新诺明、青霉素耐药呈逐年增加趋势，与李春儿等报道相似[4]。MRSA和MRCNS的检出率分别为47.5%和85%，与2011年CHINET中MRSA的平均检测率为50.6%相近[3]，MRCNS检出率高于钱晋希报道的检出率为49%[5]。MRSA染色体中含有mec A基因，能合成对β-内酰胺类抗生素亲和力很低的PBP2a，因而很少或不被β-内酰胺类药结合，在β-内酰胺类抗生素存在的情况下，细菌仍能生长，表现出耐药性[6,7]。检出凝固酶阴性葡萄球菌要考虑检出部位，区分定植菌和致病菌，结合患者的临床症状来综合判断。

肠杆菌科细菌主要分离于尿液和痰标本，大肠埃希杆菌在泌尿系感染中始终占首位，未出现耐碳青霉烯类菌株。由于ESBLs的编码质粒常常携带氨基糖苷类、喹诺酮类等抗菌药物的耐药基因，因而产ESBLs菌株多表现为多重耐药[8]。

表2 主要G-杆菌对常用抗菌药物的耐药率(%)

非发酵菌主要分离于痰标本，来源于重症监护病房。非发酵菌耐药率呈总体上升趋势，铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药率为39.90%、50.30%，且逐年上升。铜绿假单胞菌对多种抗菌药物存在天然耐药性，其耐药机制主要为与抗菌药物接触后产生多种β-内酰胺酶，如头孢菌素酶，金属酶等，通过靶位改变和流出泵机制及膜孔使蛋白丢失，从而使抗菌药物的通透性降低。生物膜形成物理屏障，导致抗菌药物的渗透性降低[9]。鲍曼不动杆菌的主要耐药机制为产生灭活酶或钝化酶，对抗茵药物进行水解或修饰，主动外排，外膜孔蛋白和青霉素结合蛋白的改变，抗菌药物作用靶点的改变[10,11]。

综上所述，临床医师需要充分了解本地区不同部位常见病原菌分布及耐药变迁情况，合理使用抗菌药物，以延缓和减少耐药菌株的产生，最大程度地降低耐药率。

[1]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:736-753.

[2]黄卫春,张蓓,徐翀,等.3812株临床常见细菌耐药性分析[J].检验医学,2010,5(25):387-390.

[3]胡付品,朱德妹,汪复,等.2011年中国CHINET细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志2012,9(20):321-329.

[4]李春儿,林奇龙,陈琼娜.2010至2012年金黄色葡萄球菌医院感染的临床分布及耐药性变迁[J].检验医学,2013,6(28):560-562.

[5]钱晋希,吴辉云.153株血浆凝固酶阴性葡萄球菌感染及药敏分析[J].实验与检验医学,2012,30(5):493-494.

[6]郭洁,郑格林,张平.260株金黄色葡萄球菌的耐药分析[J].中国卫生检验杂志,2008,18(12):2637-2638.

[7]陈燕.132株金黄色葡萄球菌的耐药性分析[J].实验与检验医学, 2012,30(6):641.

[8]段建春,吕晓菊,赵燕,等.产ESBLs肠杆菌科细菌对氨基糖苷类抗生素耐药机制研[J].中国抗生素杂志,2005,30(9):555-558.

[9]衣美英,刘迎春,王鹏远,等.耐亚胺培南铜绿假单胞苗外膜孔旦白与β-内酰胺酶研究[J].中华医院感染学杂志,2007,17(10):1198-1200.

[10]李依萍.鲍曼不动杆菌的耐药机制[J].国际检验医学杂志,2013,4 (34):840-843.

[11]张宾,袁水斌,蔡敏,等.270株来自肿瘤患者的鲍曼不动杆菌耐药性分析[J].实验与检验医学,2013,31(5):440-441.