刘伟芬 李禄辉

(河南省医药学校专业科，开封475004)

三七皂甙类成分分析方法研究进展

刘伟芬 李禄辉

(河南省医药学校专业科，开封475004)

综述了近年来三七及其制剂中化学成分分析测定的研究进展。介绍现代仪器分析方法在其中的应用，包括光谱法、色谱法等，为三七及其制剂的质量标准制定及质量控制提供有益的借鉴。

三七皂甙；分析方法；HPLC-UV；HPLC-ELSD近红外光谱；HPLC-HNMR

三七又称田七、山漆、金不换、三七参、人参三七等。三七Panax notoginseng(Burk)F.H.Chen是我国名贵的中药材，具有化瘀止血、活血定痛的功效，被誉为血证良药、伤科要药。三七含有皂甙、三七素、多糖、氨基酸、挥发油、脂肪酸、植物甾醇、黄酮苷等。由于三七是人参的近缘植物，许多化学工作者常借鉴于人参的研究，特别是对皂甙类成分作了比较系统深入的研究。现代药理研究也表明，皂甙具有多种药理活性，为三七的主要有效成分之一［1］。

早期，皂甙类成分的分析仅限于其中总皂甙的分析，且分析方法限于重量法和比色法。随着更多精密仪器的出现，三七及其制剂的检测方法也有了很大的发展，使精确测定其中的单体皂甙成为可能，也为三七及其制剂提供了质控指标。

1 总皂甙分析方法

1.1 重量测定法［1］提取三七皂甙后直接称重的方法称为重量法。利用重量法测定三七总皂甙方法简单、快速，但由于提出的所谓总皂甙往往混有不少杂质(糖类、有机酸及无机盐等)，因此测定结果往往偏高，误差较大。

1.2 大孔吸附树脂-比色法 周家明［2］等报道了三七颗粒饮片中总皂甙的含量测定。用大孔吸附树脂富集纯化总皂甙，后用比色法测定。刘爱萍［3］等报道了三七片中总皂甙含量测定。显色剂为5%香兰素醋酸溶液极高氯酸，样品用乙醚和水除去其中的脂溶性和水溶性成分，减少比色干扰，水饱和的正丁醇回流提取。

1.3 溴加成法 梁小燕等［4］采用溴加成法、分光光度比色法测定三七叶苷的含量，并对其进行比较后认为分光光度比色法测定三七叶苷的含量较佳。

2 单体皂甙的分析方法研究进展

2.1 近红外光谱和联用HPLC快速无损分析 近红外光谱(NIRS)是近几年来进入制药行业的高效绿色分析新技术。可以直接对固体进行扫描分析，具有快速、无损，不使用有机溶剂，样品制备简单等优点。杨南林［5］等报道了中药材三七中皂甙类成分的近红外光谱无损分析新方法，该方法快速无损，结果可靠。

2.2 HPLC分析法及HPLC与光谱在线联用分析法

2.2.1 HPLC-UV定量分析方法 中国药典2010年版用HPLC-UV进行三七中皂甙含量测定［6］。钱鑫、徐飞［7］等用FHPLC法测定云南白药胶囊中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1的含量，准确可靠，重复性好。

2.2.2 HPLC-ELSD测定三七中的皂甙类成分 蒸发光散射检测器的信号响应不依赖于样品的光学性质，适用于挥发性低于流动相的组分，可用于不吸收紫外光的组分，因而应用范围比较广泛。在三七及其制剂的含量测定中，用蒸发光散射检测器的较多。

朱洁，温敏［8］等比较HPLC-UV用HPLC-UV及HPLC-ELSD测定三七胶囊中人参皂甙Rg1和Rb1。证实了HPLC-ELSD法用于人参皂苷Rg1、Rb1的测定较HPLC-UV有其明显优势。

2.2.3 高效液相色谱-电喷雾电解离质谱联用 LIU Jinhuai［9］等报道了中药化学成分的HPLC／ESI-MS分析。三七成分获得了良好的分离与检测。通过与对照品的保留时间、正负离子质谱比较，鉴定了14个成分，根据正负离子质谱数据和文献，分析推断了41个成分。其中，一些皂甙成分为首次在三七中发现，有助于进一步对三七活性成分研究及质量控制。

Li Li［10］等报道了液相色谱-电喷雾电解离质谱法对三七中皂甙类成分分析检测，检出8种主要成分。通过分子离子峰［M-H］-和［M+AcO］-确定了分子量，即使在没有对照品的情况下，LC-ESI-MS也能用来鉴别分析三七中已知及未知的成分。

2.4 核磁共振法-质谱联用定性、定量分析三七中皂甙类成分 袁卫梅、司立鲜［11］报道了不同规格三七的HNMR指纹图谱比较。但HNMR图谱只是给出了药材中含有某个成分，但不能给出各个成分的量。

董阿玲［12］等报道了从三七中分离微量成分三七皂甙R2的方法。通过核磁共振和质谱联用确定了三七中的三七皂甙R2含量为0.0045%。此方法简便易行，大大降低了成本，为大量制备微量成分三七皂苷R2提供了一条简便可行的途径。

2.5 薄层扫描法测定三七中皂甙类成分 TLCS用于中药定性较好。定量分析误差大，影响因素多，检测过程耗费大量时间，故薄层扫描法已不能作为全定量分析，仅能作为大部分中药品种的半定量分析方法。

3 展望

薄层扫描法作为中药的鉴别方法，还将占有一席之地。由于其重现性差、操作误差大，只能用于半定量分析；高效液相色谱仪的普及，特别是分析技术的日益提高，实现了色谱、光谱及色谱、质谱的在线联用，使分离、分析能同步完成，将是三七中各种成分的主要分析手段。

［1］郑广植，杨崇仁.三七生物学及其应用［M］.北京：科学出版社，1994：1-3，27-28.

［2］周家明，崔秀明.三七颗粒饮片中总皂甙的含量测定［J］.人参研究，2003，(3)：38-39.

［3］刘爱萍，杨琼.三七片中总皂甙含量测定［J］.时珍国医国药，1999，10(6)：414.

［4］梁小燕，陈海珊，陈秀珍，等.三七叶甙含量测定方法比较［J］.广西植物，1996，16(7)：287.

［5］杨南林，程翼宇，吴永江，等.中药材三七中皂甙类成分的近红外光谱快速无损分析新方法［J］.化学学报，2003，61(3)：393-398.

［6］国家药典委员会编.中华人民共和国药典2010年版.［S］.一部.北京：化学工业出版社，2010：11.

［7］钱鑫，徐飞.HPLC法测定云南白药胶囊中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1的含量［J］.西北药学，2013，28(3)：263-265.

［8］朱洁，温敏，张洪彬.HPLC-ELSD测定三七胶囊中人参皂甙Rg1和Rb1［J］.中成药，2004，26(1)：33-35.

［9］LIU Jinhuai，WANG Xuan，CAI Shaoqing，et al.Analysis of Constituents in the Chinese Drug Notoginseng by Liquid Chromatography-Electrospray Mass Spectrometry［J］.Journal of Chinese Pharmaceutical Science，2004，13(4)：225-237.

［10］Li Li，Rong Tsao，Jianpeng Dou，et al.Detection of saponins in extract of Panax notoginseng by liquid chromatography-electrospray ionization-mass specteometry［J］.Analytica Chimica Acta，2005，536：21-28.

［11］袁卫梅，司立鲜.不同规格三七的1HNMR指纹图比较［J］.中国实验方剂学杂志，2003，9(4)：63.

［12］董阿玲，郑俊华，果德安，等.从三七中分离微量成分三七皂苷R2的方法［J］.中国中药杂志，2002，27(10)：793-794.

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.03.104

1672-2779(2014)-03-0162-02

苏 玲 本文校对：蒲晓辉

2013-10-30)