BM1259与丝兰素对蛋鸡排泄物存放过程中氨氮释放作用的比较研究

2014-01-22张为利喻礼怀肖天荣刘正旭徐登辉李志兵张艳云

饲料工业 2014年16期

■张为利喻礼怀肖天荣刘正旭徐登辉李志兵张艳云

(1.扬州大学动物科学与技术学院，江苏扬州 225009；2.宝应金鸡禽业有限公司，江苏宝应 225815)

动物生产过程产生的恶臭问题正逐渐引起关注和重视。生物除臭饲料添加剂渐渐成为减少畜舍恶臭的重要方法。丝兰提取物(天然类固醇萨洒皂角苷，YUCCA)是我国批准的唯一一种饲用除臭剂，减少畜舍氨气效果明显[1-3]。但资源有限，价格高。我国允许用作饲料添加剂的地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌也有一定的减少畜舍氨气的作用，但尚未见有以除臭为主要功效的饲用微生态制剂产品。

巨大芽孢杆菌1259（Bacillus.megaterium1259，BM1259）制剂，是一种正在研发的新型除臭调理饲料添加剂。张艳云等（2008）[4]研究表明，在产蛋鸡日粮中添加2×106CFU/g的BM1259可降低冬季密闭鸡舍空气氨浓度53%～74%，硫化氢浓度55%～90%。霍永久等（2012）[5]研究显示，BM1259制剂可以减少生长肥育猪粪氨气释放量。但未见有BM1259与丝兰提取物作用比较的研究报道。本试验旨在通过测定和分析日粮中添加了BM1259与添加了丝兰素的蛋鸡排泄物在不同存放时间氨态氮、尿素氮、尿酸的浓度以及脲酶活性、pH值，比较在日粮中添加这两种制剂对蛋鸡排泄物存放过程中几种指标的变化及影响，为BM1259作为饲料添加剂除臭剂应用提供一定的依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

BM1259制剂由“新型生物饲料添加剂——BM1259的研制”课题组提供。BM1259制剂含活菌数为1010个/g。

丝兰素采购自上海优久生物科技有限公司，主要成分由丝兰属植物提取加工而成。

1.2 试验动物与试验设计

选取饲养环境、养殖规模、养殖密度相近的两栋320日龄京红一号蛋鸡，每栋8 000只，随机选取一栋饲喂在基础日粮中添加150 g/t丝兰素，另一栋饲喂在基础日粮中添加200 g/t BM1259制剂。基础日粮组成及营养水平见表1。试验前和试验第28 d，在两栋鸡舍环境条件相同的位置分别选取4个重复，每个重复9只鸡，收集30 min内排出未污染的新鲜排泄物。测得正式试验前两组排泄物中氨氮浓度差异不显著（P＞0.05）。

1.3 饲养管理

两栋鸡舍的大小结构基本一致，采用3层阶梯式笼养，每笼3只，按产蛋鸡常规的生产管理程序对两栋蛋鸡进行饲养管理。每天观察蛋鸡采食、粪便以及精神状况。

表1 基础日粮组成及营养水平(风干基础)

1.4 样本的采集与处理

试验第28 d上午9：00收集试验鸡30 min内排出未经污染的新鲜排泄物。按每个重复混匀，每个重复取90 g蛋鸡新鲜排泄物于500 ml的锥形瓶中，每个锥形瓶中加入270 ml生理盐水，置于30℃水浴存放，并分别于 0、6、12、24、48、72、168 h 各取 10 ml溶液，4℃、4 000 r/min离心5 min，氨态氮测定离心10 min。取上清液测定其中氨态氮、尿素氮、尿酸的浓度及脲酶活性。

1.5 测定指标与方法

NH3-N的测定采用靛酚蓝比色法[6]；尿酸的测定采用试剂盒法（试剂盒购自南京建成生物工程研究所，编号为C012）；尿素氮测定采用试剂盒法（试剂盒购自南京建成生物工程研究所，编号为C013-1）；脲酶活性的测定采用靛酚蓝比色法[7]。脲酶活性以每24 h每克粪样产生的氨氮毫克数为单位；pH值测定采用Sartorius PB-21型酸度计[8]。

1.6 数据处理

用Excel 2012软件初步整理数据，采用SPSS 13.0软件中的独立性T检验进行平均数显著性比较，结果以“平均数±标准误”表示。

2 结果

2.1 日粮中添加BM1259与添加丝兰素对蛋鸡排泄物存放过程中氨态氮浓度变化的比较(见图1)

从图1可以看出，BM1259组和丝兰素组蛋鸡排泄物中氨态氮浓度均随着存放时间的增加而增长，变化基本一致，上升的范围在0.3～0.7 mg/g。0～12 h上升的速度较快，12～72 h保持在一定的水平，72 h～7 d间略有上升。两组各时间段氨态氮浓度均差异不显著（P＞0.05）。说明日粮中添加BM1259与添加丝兰素对蛋鸡排泄物存放过程中氨态氮浓度影响基本相同。

图1 日粮中添加两种不同制剂蛋鸡排泄物存放过程中不同时间段的氨态氮浓度

2.2 日粮中添加BM1259与添加丝兰素对蛋鸡排泄物存放过程中尿酸浓度变化的比较（见图2）

图2 日粮中添加两种不同制剂蛋鸡排泄物存放过程中不同时间段的尿酸浓度

从图2可以看出，BM1259组和丝兰素组蛋鸡排泄物中尿酸浓度变化趋势一致，0～12 h略有上升，12～72 h尿酸浓度降低，72 h～7 d基本稳定。两组尿酸浓度除72 h BM1259组显著低于丝兰素组（P＜0.05）外，其他各时间段均差异不显著（P＞0.05）。说明日粮中添加BM1259与添加丝兰素对蛋鸡排泄物存放过程中尿酸浓度影响趋势基本相同；添加BM1259与添加丝兰素相比，可明显降低蛋鸡排泄物存放72 h尿酸浓度。

2.3 日粮中添加BM1259与添加丝兰素对蛋鸡排泄物存放过程中尿素氮浓度变化的比较(见图3)

图3 日粮中添加两种不同制剂蛋鸡排泄物

从图3可以看出，在7 d存放期间BM1259组和丝兰素组蛋鸡排泄物中尿素氮的浓度均为先下降后上升，变化趋势基本一致。0～24 h明显下降，24 h～7 d逐渐上升。各时间段两组尿素氮浓度统计学差异都不显著（P＞0.05）。说明日粮中添加BM1259与丝兰素对蛋鸡排泄物存放过程中尿素氮浓度变化影响基本一致。

2.4 日粮中添加BM1259与添加丝兰素对蛋鸡排泄物存放过程中脲酶活性变化的比较（见图4）

图4 日粮中添加两种不同制剂蛋鸡排泄物存放过程中不同时间段的脲酶活性

从图4可以看出，BM1259组与丝兰素组蛋鸡排泄物中的脲酶活性变化趋势一致，0～12 h脲酶活性迅速下降,12～24 h迅速上升，24～72 h缓慢上升。两组排泄物中脲酶活性范围在1.244 2～2.297 3 μg/(g·h)之间，除存放168 h BM1259组极显著高于丝兰素组（P＜0.01）外，其他各时间点两组间差异均不显著（P＞0.05）。

2.5 日粮中添加BM1259与添加丝兰素对蛋鸡排泄物存放过程中pH值变化的比较(见图5)

图5 日粮中添加两种不同制剂蛋鸡排泄物存放过程中不同时间的pH值

从图5可以看出，两组蛋鸡排泄物pH值随着存放时间变化的趋势基本一致，0～6 h时明显下降，12～48 h时pH值上升，72～168 h又明显下降。整个存放期间各时间点两组间排泄物pH值差异均不显著（P＞0.05），pH值变化范围在6.60～7.06。

3 讨论

梁国旗等（2009）[1]研究表明，丝兰素能有效减缓氨态氮的产生，减少氨气的散发，改善畜禽舍空气环境。李晓刚（2012）[9]研究表明，BM1259能够降低尿酸、尿素降解为氨态氮的速度，降低消化道内容物pH值，从而减少蛋鸡排泄物中氨气气体的释放。程志斌等（2012）[10]在研究丝兰提取物与枯草芽孢杆菌对肉鸡舍臭气影响中的研究表明，丝兰素与枯草芽孢杆菌组合使用能够显著降低鸡舍氨气的释放，改善肉鸡生长性能。

鸡舍氨气的最主要来源是排泄物中含氮化合物在微生物作用下转化为氨气，特别是尿酸、尿素在微生物酶作用下降解为氨，而氨易挥发；而且排泄物中的pH值影响氨的挥发。本试验结果显示，在整个试验期间各时间段BM1259组与丝兰素组排泄物中氨态氮、尿素氮、尿酸浓度及脲酶活性和pH值，除72 h BM1259组尿酸浓度显著低于丝兰素组、168 h BM1259组脲酶活性极显著高于丝兰素组外，其他各时间点各指标两组间差异均不显著，而且各指标变化趋势基本一致。说明日粮中添加BM1259，对蛋鸡排泄物存放过程中氨氮的释放作用相近。