任志国

(山东医学高等专科学校附属医院，山东临沂276004)

铁皮石斛是兰科石斛兰属多年生草本植物［1］。《神农本草经》记载其有主伤中、除痹、下气、补五脏虚劳羸瘦、强阴、久服厚肠胃的功效［2，3］。多项研究已证实，铁皮石斛中的石斛多糖具有明显抗氧化、抗肿瘤、提高免疫力、促消化、抗疲劳和抑菌等［4］作用。B细胞性非霍奇金淋巴瘤占全部淋巴瘤病例的68%［1］。近年来，多种治疗方法和药物，如化疗、自体造血干细胞移植、放疗、干扰素等，被用于治疗B细胞性非霍奇金淋巴瘤［2］，但肿瘤缓解率及患者生存率都不理想。2013年6～12月，我们观察了石斛多糖对人Burkitt淋巴瘤Raji细胞增殖的影响，并探讨其机制。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 铁皮石斛由连城铁皮石斛生物制药组培基地惠赠，人Burkitt淋巴瘤Raji细胞株购自中科院上海细胞库，Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒购自上海七海生物科技有限公司;RNA提取试剂盒购自北京TIANGEN公司;MTT购自Sigma公司，RPMI1640、胎牛血清等购自Gbico公司。引物由上海赛百盛生物公司合成。其他试剂均为国产分析纯。

1.2 方法

1.2.1 石斛多糖的提取与制备 铁皮石斛充分干燥后打成细粉，称取200 g铁皮石斛细粉，60℃石油醚回流脱脂，取残渣挥干溶剂后，80%乙醇回流后挥干溶剂。布氏漏斗抽滤提取液和洗涤液得到浓缩液，Sevag法脱蛋白［5］。取上层液体，以1:4比例加入乙醇沉淀后，抽滤干燥，即得石斛多糖。硫酸蒽酮比色法测定糖含量为82.34%。称取石斛多糖，溶于生理盐水配成适当浓度，过滤除菌备用。

1.2.2 细胞培养及分组 10%胎牛血清1640培养液(含1%青链霉素)，37℃，5%CO2培养人Burkitt淋巴瘤Raji细胞株，每2～3天传代1次。……