HPLC-MS/MS法测定树莓中树莓酮含量的研究
2013-12-18王小杰孟宪军
李 斌, 王小杰, 杨 磊, 孟宪军*
1.沈阳农业大学食品学院, 沈阳 110866;2.阜新桃李园集团公司, 辽宁 阜新 123000
树莓是一种蔷薇科植物,其果实中含有的主要芳香类化合物为树莓酮[4-(4-羟基苯基)-2-丁酮,raspberry ketone,RK][1,2],是一种已广泛应用的具有幽香果香的食用香精[3],具有影响脂肪代谢从而抗肥胖的作用[4]。树莓酮是树莓的特征气味成分,其阈值为1~10 μg/L[5,6]。树莓酮属于甲基酮类化合物,与辣椒素结构相似[7],目前,对其生物合成、功能特性及检测方法都有广泛研究[8~10]。树莓酮的测定方法主要有气相色谱法[11,12]和分光光度法[13]。由于树莓酮在树莓中的含量较少,经实际检测发现,这两种方法在测定中并不非常适用,因此需要开发更加灵敏的检测方法。本研究建立了液相色谱-质谱/质谱仪测定方法,灵敏度高,适用于树莓酮的检测。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
树莓果实,干燥后粉碎,过60目筛备用;天然树莓酮,纯度≥99%,购自武汉合中医药原料有限公司;甲醇、乙腈、乙酸乙酯为色谱纯,购自Fisher公司;乙醚、HCl、NaHCO3、NaOH、Na2SO4均为分析纯,购自国药集团化学试剂有限公司。实验室用水为高纯水。
1.2 主要仪器
数控超声波清洗器,KQ-100DB型,昆山市超声波仪器有限公司产品;电热恒温水槽,DKB-8A型,上海精宏实验设备有限公司产品;电热恒温鼓风干燥箱,DHG-9070A型,上海精宏实验设备有限公司产品;旋转蒸发器,RE-52AA型,上海亚荣生化仪器厂产品;三重四级质谱仪,API 4000型,美国应用生物系统公司产品;液相色谱仪,LC 20A型,日本岛津公司产品;旋转蒸发仪、氮吹仪、离心机等。
1.3 方法
1.3.1标准溶液的配制 准确称取树莓酮标准品0. 010 0 g,置于100 mL棕色容量瓶中,甲醇溶解定容,混匀,配制成100 mg/L的标准储备溶液,4℃保存。……
