张慧儿，裘莉佩（1.宁波市镇海区炼化医院检验科，浙江宁波31507；.宁波市李惠利医院检验科，浙江宁波 31507）

假丝酵母菌属是一大类条件致病菌，可侵犯皮肤、黏膜和内脏，表现为急性、亚急性或慢性炎症，大多为继发性感染，亦可进入血液引起败血症。近年来，由于各种侵袭性检查治疗手段的开展，如中心静脉置管、介入治疗、器官移植等以及免疫抑制剂和广谱抗菌药物的广泛使用，深部真菌感染病例明显上升，其中假丝酵母菌属最为常见，已成为国内、外医院获得性血流感染病原体和医院感染致病菌的重要组成部分，真菌的感染越来越严重地威胁着患者的生命安全，关于真菌的研究已经成为国内、外的研究热点[1-3]。宁波市镇海区炼化医院为国家级二级乙等医院，其前身为中国石化镇海炼化公司职工医院，医院核定床位128张，现有职工294人，日门诊量150人左右，患者多为镇海区炼化公司在职职工和离退休职工，其中60岁以上老人占1/3左右。目前国内、外关于假丝酵母菌相关研究较多，但是从年龄阶段进行分层研究的较少。老年人由于机体功能以及免疫功能相对较弱，其真菌感染情况以及真菌药敏情况可能与青壮年有所差异。结合该院患者特点，现将该院2009－2011年从老年患者标本中分离的213例假丝酵母菌的菌种分布及其对抗真菌药的敏感性进行回顾性分析，以期为老年真菌感染的研究和临床治疗提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 标本来源

所有标本来源于镇海区炼化医院临床各科送检标本，患者年龄均≥60岁，临床疑似深部真菌感染患者的标本包括血液、尿液、脓液、伤口分泌物、泌尿生殖道分泌物、胸水和腹水等，不包括痰标本和大便标本。

1.2 仪器、设备及质控菌株

A2型生物安全柜（美国Thermo公司）；HF90/HF240型CO2细菌培养箱[香港力康（Heal Force）公司]；哥伦比亚血琼脂培养基[梅里埃（上海）生物化学制品有限公司]；念珠菌显色培养基（郑州博赛生物技术研究所）；ATB-ID32 C酵母菌鉴定系统及ATB-Fungus 3真菌药敏试条（法国生物梅里埃公司）。白假丝酵母质控菌株为ATCC 64548。

1.3 假丝酵母菌的培养与鉴定

按常规方法，将临床标本接种于血琼脂培养基及念珠菌显色培养基，置于CO2细菌培养箱。24～48h后根据菌落形态，结合培养基说明，在显色培养基上呈绿色的菌株为白假丝酵母菌，灰蓝色者为热带假丝酵母菌，紫色者为光滑假丝酵母菌，粉红色且边缘有微毛者为克柔假丝酵母菌。其他颜色的菌株采用ATB-ID32 C酵母菌鉴定系统鉴定。

1.4 药敏试验

采用ATB-Fungus 3酵母样真菌药敏试条，包括5种常用抗真菌药，即5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑，严格按试剂说明操作和结果判读。其中，两性霉素B以生长完全被抑制孔、其余4种药物以生长明显减弱孔为判读折点。克柔假丝酵母菌对氟康唑天然耐药，故无论体外试验结果如何均报告为耐药。

1.5 数据统计分析

用WHONET 5.6药敏试验统计软件进行菌种分布及敏感性统计。敏感率的比较采用卡方检验，以P＜0.05作为差异有统计学意义。

2 结果

2.1213 株假丝酵母菌属的分类构成比

在213株假丝酵母菌中，白假丝酵母菌占42.3%（90/213），非白假丝酵母菌占57.7%（123/213），见表1。

表1 213株假丝酵母菌菌种分布及构成比统计Tab 1 Distribution and constituent ratio of 213 strains of Candida

2.2 假丝酵母菌属的药敏分析

213株假丝酵母菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑的总体敏感率分别87.8%、100%、93.2%、85.9%和95.9%。以上数据显示假丝酵母菌属对两性霉素B、氟康唑、伏立康唑敏感率均在90%以上，而对5-氟胞嘧啶、伊曲康唑敏感率低于90%。90株白假丝酵母菌对上述5种抗真菌药敏感率均在90%以上，而123株非白假丝酵母菌的敏感率仅两性霉素B、氟康唑和伏立康唑在90%以上，其余2种抗真菌药敏感率低于90%。与白假丝酵母菌比较，除两性霉素B敏感率相同外，非白假丝酵母菌对其他4种抗真菌药敏感率均有所降低，其中5-氟胞嘧啶与伊曲康唑敏感率差异具有统计学意义（P＜0.05），详见表2。

表2 假丝酵母菌对5种抗真菌药的敏感率统计（%%）Tab 2 Sensitive rate of Candida to 5antifungal agents（%%）

3 讨论

国内众多医学工作者研究表明，由于各种抗生素的不合理应用以及免疫抑制剂的大量使用，使得患者感染真菌的机会大大增加[4-6]。其中假丝酵母菌属感染在医院感染中占有重要地位，且呈上升趋势[6-7]，尤其以白假丝酵母菌为主，可能与该菌与哺乳动物宿主细胞有很强的亲和力有关。本次从老年患者体内分离的213例假丝酵母菌中仍以白假丝酵母菌为主（占42.3%），比起周捷等[8]报道的非老年患者白假丝酵母菌占临床假丝酵母菌的70.3%，呈明显降低。在非白假丝酵母菌中，光滑假丝酵母菌明显升高，占全部假丝酵母菌的29.1%，这可能与标本构成以及患者构成有所差异造成的[6-7]，也有可能与老年患者较青壮年患者更容易感染非白假丝酵母菌有关。具体原因有待于更加深入的研究。

从本次分析的213株假丝酵母菌药敏试验结果来看，两性霉素B、氟康唑、伏立康唑对于假丝酵母菌属敏感性均在90%以上，而5-氟胞嘧啶及伊曲康唑的敏感率相对较低，但敏感率依然保持在85%以上。提示上述抗真菌药仍然是治疗假丝酵母菌感染的有效药[9]。对于白假丝酵母菌，5种抗真菌药均具有较高的敏感性，除5-氟胞嘧啶及伊曲康唑外，其余3种药物敏感率均在95%以上。对于非白假丝酵母菌，除两性霉素B外，其余4种药物的敏感性低于白假丝酵母菌，且5-氟胞嘧啶、伊曲康唑敏感率差异有统计学意义（P＜0.05）。另外，分离的4株克柔假丝酵母菌在ATB-Fungus 3真菌药敏试验均表现为氟康唑固有耐药，未见异常情况。

综上所述，同其他非老年真菌感染者一样，白假丝酵母菌虽然目前依旧是临床老年真菌感染中排名首位的菌种，但其所占比例已经较非老年患者有所下降，而非白假丝酵母菌中尤其是光滑假丝酵母菌显著增加。对于白假丝酵母菌，常用5种抗真菌药仍然高度敏感；而对于非白假丝酵母菌，5-氟胞嘧啶、伊曲康唑耐药性明显增加。究其原因，除了与真菌耐药性固有的变异以外，亦可能与患者长期大量不合理使用抗生素有关。在调查中也发现大多数患者家中均备有抗生素，平时均有无医嘱情况下自行服用抗生素的现象。另外，从职业角度分析来看，本研究大多数患者年轻时均为炼化厂一线工人，据研究，从事煤矿、橡胶生产等相关工作人员与真菌感染存在关联[10-11]。而石油炼化工作与真菌感染之间是否存在关系，尚未见相关报道，还有待进一步研究。总之，在患者中加大合理使用抗生素的宣传力度，主动提高老年人自身免疫力，对于降低真菌感染具有重要现实意义；根据药敏结果使用敏感的抗真菌药物，对于降低真菌的耐药性也具有重要意义。

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