用异源蛋白和蛋壳体外培养鹌鹑胚胎的研究
2013-12-01张文昌李玉芳庄益芬
家畜生态学报 2013年2期
张文昌,李玉芳,庄益芬*
(1. 福建农林大学动物科学学院,福建 福州 350002;2. 黄淮学院,河南 驻马店 463000)
转基因是禽类抗病育种和改善禽产品质量的快捷手段。而且禽类饲养成本低,繁殖能力高,转基因禽类可迅速扩群,禽蛋蛋白质含量高,表达的外源蛋白容易收集、保存、不易感染,作为生物反应器具有很大的优势。禽类转基因有很多途径,其中多数基因的转染、整合效率、表达水平低,只有病毒载体法[1]和显微注射法[2]比较成功地获得了转基因鸡。
禽类胚胎发育过程特殊,离开卵巢的卵母细胞在母体输卵管内受精并开始卵裂,排出体外时胚盘内已含有数以万计的细胞,此后在一定条件下,胚胎在体外蛋壳内发育成雏。禽蛋结构也独特复杂,卵黄大,卵子嵌在卵黄上,卵黄不透明,受精时多精入卵,形成多个雄原核,与雌原核融合的雄原核难以判断。可见禽胚体外培养技术对准确高效地实施卵子和早期胚胎转基因操作是至关重要的。同时禽类体外培养也是核移植、胚胎移植、体外受精以及胚胎冷冻等生物技术实施的重要环节。
禽胚体外培养技术的研究已有一百多年的历史,直到1984年Ono和Wakasugi 把正常孵化了2.5 d 的鹌鹑种蛋的除去壳以外的其他部分,原原本本地直接移入鸡蛋壳内培养,93例中有3例出雏[3]。1988年Perry综合前人研究的基础上,首次成功地将外部已包被了浓蛋白的鸡单细胞受精卵,保留浓蛋白,补充培养液,体外培养成鸡雏,实现了禽类完全体外培养的突破[4]。……
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