楼超艳 薛 宇 朱 岩 周 丹＊

（浙江大学 理学院，杭州310058）

0 前言

盐酸贝那普利片是一种常用的抗高血压药物，有效成分盐酸贝那普利是一种不含巯基血管紧张素转化酶（ACE）抑制剂的前体药。人体吸收后水解成贝那普利拉而起作用，能抑制血管紧张素转化酶Ⅰ（ACEⅠ），可用于治疗高血压和充血性心力衰竭［1］。盐酸 贝 那 普 利 化 学 名 为 （3R）－3－［［（1S）－1－（乙氧羰基）－3－苯基丙基］氨基］－2，3，4，5－四氢－2－氧代－1H－1－苯并氮杂卓－1－乙酸盐酸盐，是贝那普利以盐酸盐形式存在形成的，属于有机胺类化合物，易溶于水、甲醇和乙醇。在酸性条件下，盐酸贝那普利是以阳离子的形式存在的，因此可以采用阳离子交换柱对盐酸贝那普利进行分离和检测。2001年，霍文［2］等建立了高效液相测定贝那普利片剂含量的研究分析方法。离子色谱经过30多年的发展，已成为一种比较成熟的色谱分析法，在环境分析、微电子和电力工业中的痕量分析、食品检测、石油化工、生命科学和医药等领域的作用越来越重要，也已经有越来越多的离子分析方法录入到检测标准中［3－5］。采用离子色谱技术建立了一种检测盐酸贝那普利片含量的新方法，方法简单、灵敏、快速、准确。目前尚未见到离子色谱法分析此药物的文献报道。

1 实验部分

1.1 仪器

ICS－2100型离子色谱仪带VWD紫外检测器（戴安公司），Millipore simplicity超纯水机，KQ－100DE台式数控超声波清洗器。

1.2 试剂与样品

盐酸贝那普利对照品（批号：100768－200501）由中国药品生物制品检定所提供。盐酸贝那普利片为市售药（生产批号：X1338；每片含贝那普利10mg）。乙腈为色谱纯，甲烷磺酸为分析纯，实验用水为二次去离子水（电阻率≥18.2MΩ·cm）。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的选择

色谱条件选择为色谱柱（4mm×250mm），保护柱（4mm×50mm），淋洗液：甲烷磺酸（6mmol／L）－乙腈（35%），流速：1.0mL／min，柱温：25℃，进样量：7μL，紫外检测波长：215nm。根据以上设定的色谱条件进行分析，混合对照品溶液ガ和供试品ギ的色谱图如图1所示。

图1 对照品图谱Ⅰ和供试品图谱ⅡFigure 1 The IC chromatograms：ガthe chemical reference substance andギthe sample.

2.2 溶液的制备

对照品储备溶液（1 000mg／L）：准确称取干燥至恒重的盐酸贝那普利对照品10.0mg，置于10mL容量瓶中，加入5mL乙腈，超声20min，使盐酸贝那普利对照品溶解，并用去离子水稀释，定容，摇匀，置于4℃冰箱内保存待用。

供试品溶液：取10片盐酸贝那普利片，研成粉末，准确称取所研粉末适量（约相当于盐酸贝那普利3mg），置于100mL容量瓶中，加10mL乙腈，超声20min使盐酸贝那普利片粉末溶解，待冷却至室温，用去离子水定容，摇匀。

2.3 检测方法

使用孔径0.45μm有机滤膜过滤对照品溶液和供试品溶液，然后准确移取7μL进样。

2.4 线性考察

准确移取对照品储备溶液适量于10mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，摇匀，制备成浓度分别为0.5，1，2，5，25μg／mL的对照品溶液，在上述色谱条件进行分析，记录色谱图，以峰面积为纵坐标（Y），浓度为横坐标（X）作线性标准曲线，线性回归方程为Y＝0.482 1 X－0.005线性相关系数r＝0.999 9。

线性考察实验结果表明：盐酸贝那普利在0.5～25μg／mL范围内有良好的线性关系。

2.5 稳定性实验

取同一批供试品溶液，在上述色谱条件下，分别选取0，1，2，3，6，8，12，24，48h为时间点，进行测定，记录色谱图，测得盐酸贝那普利峰面积的RSD值为1.1%。

稳定性实验结果表明，供试品溶液在配制后48h内稳定。

2.6 精密度实验

取2.4线性项的第三个浓度对照品溶液连续进样5次，记录谱图，测得盐酸贝那普利峰面积的RSD值为0.64%。

实验结果表明，离子色谱法测定盐酸贝那普利的精密度符合技术要求。

2.7 重复性实验

取同一批样品，按2.2.2项方法配制供试品溶液6份，分别进样7μL，记录色谱图，测得盐酸贝那普利峰面积的RSD分别为1.2%。

重复性实验结果表明，离子色谱法测定盐酸贝那普利片的重复性较好，符合技术要求。

2.8 回收率实验

在供试品中加入适量对照品使其在供试品中分别成低、中、高三个不同的浓度点。色谱测定条件同2.1。加标回收率测定采用外标法，结果见表1。

表1 盐酸贝那普利片方法回收率（n＝3）Table 1 The methodological recovery tests for the benazepril hydrochloride tablets

2.9 含量测定

供试品溶液配制如2.2，色谱测定条件同2.1，记录色谱图，通过所得的线性回归方程计算样品中盐酸贝那普利含量，结果见表2。

表2 盐酸贝那普利片含量测定结果Table 2 The determination results of the benazepril hydrochloride tablets ／%

3 结语

选择的低容量的硅胶基质键合羧酸基团的中等疏水性的Ion Pac®SCS1阳离子交换柱。经比较不同浓度比例的流动相，发现甲烷磺酸和乙腈浓度增加能减少保留时间，考虑到柱子所能承受pH范围以及出峰时间及峰形等因素，最后选择甲烷磺酸（6mmol／L）－乙腈（35%）作为流动相。在 200～400nm范围内紫外扫描，在215nm和240nm处有最大吸收峰。根据光谱图、响应值及杂峰影响，最后选取215nm作为测定波长，得到的色谱图峰形尖锐，与杂峰分离度好。

采用离子色谱法精确测定了盐酸贝那普利片的含量，方法简单，快速，结果准确，可作为盐酸贝那普利片含量测定方法之一。

［1］Kaiser G.，Ackermann R，Dieterle W，et al.Determination of a new angiotensin converting enzyme inhibitor and its active metabolite in plasma and urine by gas chromatography－mass spectrometry［J］.J Chromatogr，1987，419：123.

［2］霍文，崔立杰.高效液相色谱法测定贝那普利片含量［J］.药物分析杂志，2001，21（5）：346－348.

［3］张培敏，周淡春，朱岩.离子色谱在制药分析中的新进展.药物分析杂志，2007，27（1）：151－155.

［4］张水锋，陈小珍，张东雷，李红艳，陈万勤.离子色谱－电导检测法测定不同乳制品中硫氰酸盐［J］.中国无机分析化学，2012，2（3）：60－63.

［5］吕伟德，周丹，朱岩.离子色谱法测定复方卡托普利片中卡托普利和氢氯噻嗪的含量［J］.中国无机分析化学，2012，2（3）：73－75.