陈智平，蔡豪斌，伍惠玲，王茂水，何 雨，李 山，秦 雪＊

（1.广西医科大学公共卫生学院，广西 南宁530021；2.英美特生物技术研究所，广西 桂林541001；3.广西医科大学第一附属医院 临床实验部，广西 南宁530021；4.广西医科大学 医学检验系，广西 南宁530021）

巨细胞病毒在人群中具有极高的感染率，血清阳性率40%－100%不等，美国FDA批准用于抗巨细胞病毒的药物较少，且这些药物存在有较多的副作用：造血抑制、低生物吸收度、肾毒性、生殖毒性等。所以有必要筛选新型低毒的抗巨细胞病毒药物。特别是从中草药中筛选抗巨细胞病毒药物。

冬虫夏草（Cordycepssinensis）是我国一种名贵的中草药材。目前有多种生物活性被报道：提高免疫力，抗肿瘤等。本研究既探讨冬虫夏草水提物的体外抗巨细胞病毒活性。

1 材料与方法

1.1 冬虫夏草的水提物的制备

冬虫夏草为桂林淮安公司赠送。冬虫夏草子实体经高速组织捣碎机处理后，放于超纯水（Milli－Q ultrapure water systems）中低温浸提3次，每次24 h。每次浸提结束后，离心处理（3 000rpm，4℃，10 min），再重新浸取。最后合并3次浸取上清，冻干处理。使用时，称量并溶于培养基（10%DMEM，10%胎牛血清）中，经0.22μm滤器过滤后使用。

1.2 原代细胞培养以及巨细胞病毒制备

人包皮成纤维细胞（HFFs）由桂林英美特生物技术研究所保存，所采用的细胞代数为6－14代。培养基为DMEM（美国Hyclone），含10%胎牛血清（杭州四季青生物工程公司）、100U／ml青霉素、100 μg／ml链霉素。人巨细胞病毒tw－87购自ATCC，经过扩培后［1］，－80℃冻存备用，并且确定其滴度。

1.3 细胞毒性试验

通过MTT法［2］检测冬虫夏草水提物的细胞毒性。在37℃，5%CO2培养条件下，HFFs（104／孔）接种至96孔板，待细胞贴壁后，加入同量梯度稀释的冬虫夏草水提物。……