华浅近， 祖茂衡， 滕 飞， 王 磊， 胡 琳

我国布加-综合征（Budd-Chiari syndrome，BCS）以下腔静脉和（或）肝静脉开口处隔膜阻塞型为主，其特征是下腔静脉和（或）肝静脉开口处隔膜形成，而隔膜的形成机制至今尚未明确［1］。病理学研究发现成纤维细胞为该隔膜主要构成成分之一，隔膜组织中成纤维细胞生长因子受体 （fibroblast growth factor receptor，FGFR）的表达明显高于正常血管壁组织［2］。此外，国内流行病学研究发现BCS的发病率与饮用水中碘含量呈正相关［3］，同时一定浓度的高碘培养环境能促进成纤维细胞、血管内皮细胞增殖［4-5］。

本研究以CCK-8检测法［6］检测FGFR抑制剂SU5402与适宜浓度碘离子共同作用下成纤维细胞的增殖情况，应用免疫印迹法检测不同浓度碘离子培养环境中成纤维细胞的碱性成纤维细胞生长因子 （basic fibroblast growth factor，bFGF）、FGFR2 蛋白表达的情况，探讨高碘促成纤维细胞增殖作用与bFGF、FGFR2的关系及与下腔静脉隔膜形成的相关性。

1 材料与方法

1.1 细胞株培养

HFL1人肺成纤维细胞（目录号GNHu28）购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。细胞培养于Corning培养皿中，采用F12K培养基（Sigma公司），加10%胎牛血清 （Gibco公司）。于37℃、5%CO2条件的培养箱中静置培养，至细胞贴壁生长汇合即可传代，每周传代2次，选取第5～6代细胞用于实验。

1.2 细胞增殖检测

取对数生长期的成纤维细胞，胰酶消化后制成细胞悬液，用细胞计数板作细胞计数，测定细胞密度，再用培养基稀释至5×104个/ml。将细胞悬液接种至96孔板中，每孔约5 000个细胞，分为5组：①空白对照组 （每孔100 μl细胞悬液，20 μl F12K培养基）； ② 溶媒组 （每孔 100 μl细胞悬液，19 μl F12K 培养基，1 μl DMSO）；……