★ 王飞 黄佩蓓 曾贤 揭辉洋 余春波

(江西中医学院 南昌 330004)

白木通基因组DNA提取方法研究*

★ 王飞**黄佩蓓***曾贤 揭辉洋 余春波

(江西中医学院 南昌 330004)

以白木通新鲜叶片为材料，采用改良CTAB法提取DNA，并对提取的DNA进行了纯度鉴定和PCR检测。结果表明：改良的CTAB提取法，能够有效去除次生物质对DNA的干扰，提高提取DNA的质量和纯度，适宜白木通叶片DNA的提取。该改良法提取的DNA可用于SRAP分析。

白木通；DNA提取

白木通(Akebiatrifoliata(Thunb.)Koidz.var. Australis(Diels))为木通科木通属落叶木质藤本植物，是《中华人民共和国药典》[1]收载的珍稀濒危中药材原植物。为了保证其可持续性利用，有必要进行其种质资源遗传多样性研究，而获取高质量的基因组DNA是进行种质资源遗传多样性研究的基础。[2]不同的植物由于体内色素、酚类和多糖等次生物质的含量不同，其所需要的DNA提取方法不同。[3]目前，提取植物基因组DNA的方法有CTAB法、SDS法、、高盐低pH法、碱裂法、苯酚法、热解法、试剂盒提取DNA的方法等。[4]CTAB(十六烷基三乙基溴化铵)因可有效地去除样品中的蛋白质、多糖等杂质，是植物中常用的DNA提取方法。本研究以白木通新鲜叶片为提取材料，采用改良CTAB法提取白木通基因组DNA，以期获得高质量的基因组DNA，为进一步的白木通种质资源遗传多样性研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试材料

试验材料采自江西井冈山，经赖学文教授鉴定，移植保存于江西中医学院神农园。

1.1.2 仪器与试剂

仪器：XPcycler-PCR(BIOER)、核酸蛋白测定仪(Eppendorf)、JM-250电泳仪(Jim-X)、电泳槽(Jim-X)、H-1650高速离心机(xiang yi)、凝胶成像分析仪(Alpha Innotech)、HH-S数显恒温水浴锅。……