吸入性麻醉药对促炎性细胞因子表达的影响
2013-09-21李丽莎
李 江,李丽莎
(云南省第一人民医院麻醉科/昆明理工大学附属医院,昆明650031)
严重创伤,重大手术创伤、休克、感染、脏器缺血再灌注损失、内毒素血症是围术期常见的现象。围术期过激炎症反应的调控近年来一直是重点研究领域,众多在体及离体的研究显示吸入麻醉药可明显减少心、脑、肺、肝、肾等器官的损伤,保护脏器功能[1-3],其机制较复杂,涉及很多方面。其中,异氟醚为目前临床最常用的吸入麻醉药物之一,其对炎性因子的影响一直存在争议。因此,本研究观察了吸入麻醉药异氟醚对大鼠促炎性细胞因子表达的影响,旨在为临床应用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料 选择成年雄性Lewis大鼠,8周龄,体质量200~250g,由上海史莱克动物提供商供应,于上海实验动物中心(SPF级)预检3d,一笼饲养4只,动物室和实验室温度为23℃,12h明暗轮流光照,自由饮食。异氟醚(isoflurane)(河北九派制药有限公司),脂多糖(Sigma公司),生理盐水(山东华鲁制药有限公司),牛胎儿血清(fetal bovine serum,FBS)(Gibco公司),磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS),戊巴比妥钠,5mL离心管,15mL离心管,2mL的一次性注射器,针头(16G),Narcomed 2B麻醉机(Drager公司),有机玻璃麻醉箱(40cm×30cm×30cm)购于北京有机玻璃厂,多功能气体检测仪(Datex-Ohmeda,芬兰),大鼠白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、ELISA 试剂盒(博士德公司),Trizol RNA 分离液(美国Promega公司),RT-PCR试剂盒(美国Promega公司),甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、TNF-α 引 物(Invitrogen公司),细胞计数仪 Vi-cellXR(美国 Beckman Coulter),大鼠固定器。
1.2 方法
1.2.1 实验动物分组 将24只Lewis大鼠采用随机数字法随机分为3组:正常组、对照组、异氟醚组,每组8只。除正常组之外,其余组均放入密闭有机玻璃麻醉箱内,进气端与麻醉机呼吸回路相连通,出气端接多功能气体检测仪并与大气相通。……
