唐 群，何泽云，陈 丽，徐文峰，曾海飞

（1.湖南中医药大学，长沙410208；2.湖南中医药大学第一附属医院，长沙410007）

研究指出，肾小管间质部分的慢性氧缺失是促进肾脏疾病进展和纤维化的重要原因［1］。体外实验证明，缺氧可刺激肾小管上皮细胞和间质成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转分化，参与肾间质纤维化的发生、发展［2］，缺氧主要通过缺氧诱导因子1α（hypoxia－inducible factor 1α，HIF－1α）发挥作用［3］，后者可调控结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）表达。现将本研究探讨HIF－1α在慢性肾间质纤维化中的作用以及六味地黄汤对其表达的影响报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 清洁级雄性SD大鼠30只，体质量（200±10）g，由湖南中医药大学实验动物中心提供并饲养于湖南中医药大学SPF级动物房。

1.1.2 药物 六味地黄汤（熟地黄24g，山药12g，山茱萸12 g，泽泻9g，茯苓9g，牡丹皮9g）购自湖南中医药大学第一附属医院药剂科。先将药材用相当于药材5倍的自来水浸泡2 h，煮沸后再微火煎熬30min，过滤后收集煎液，原药渣加少量水煎煮，取二煎液。将两煎液混合，于水浴恒温器上浓缩药液至含生药1g／mL。

1.1.3 主要试剂 一抗为兔抗大鼠HIF－1α、CTGF多克隆抗体（美国Santa Cruz），兔二步法检测试剂盒（PV－6001）、二抗为非生物素标记山羊抗兔IgG抗体（北京中杉金桥公司），DAB显色试剂盒（武汉博士德公司），ECL化学发光试剂（美国Pierce公司）。

1.2 方法

1.2.1 造模 SD雄性大鼠适应性喂养1周后随机分为假手术组（10只）、模型组（10只）和六味地黄汤组（10只）。假手术组打开腹腔暴露肾脏后避免牵拉肾脏，不切除肾脏。模型组、六味地黄汤组大鼠均在无菌条件下进行5／6肾切除术，以10%水合氯醛0.30mL／100g腹腔注射麻醉大鼠，常规消毒铺巾，从左腹部切口，打开腹腔，静脉夹夹住肾蒂后迅速切除左肾上下极（切除2／3），以吸收性明胶海绵压迫止血，复位肾脏。……