王文新，邱建武

（辽宁医学院附属：1.研究生学院；2.第一医院神经外科，辽宁锦州121001）

核转录因子－κB（nuclear factor－kappa B，NF－κB）是一类广泛存在于细胞中的多显性核转录因子，可以调控多种基因的转录和表达，与肿瘤细胞的生长、增殖、凋亡关系密切，在肿瘤的发生、发展中起重要作用［1］。异常的NF－κB活性在人类恶性胶质瘤的局灶性坏死形成中至关重要，NF－κB活性的抑制或NF－κB调节基因被证明能促进脑肿瘤生长、发病和血管转移［2－3］。NF－κB的异 常 激 活 表 达 与 多 种 疾 病 的 发 生 有 关［4－5］。研究表明，多种抗肿瘤药物能引起NF－κB的活化［6］。吡咯烷二硫代氨基甲酸（pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC）可抑制NF－κB的亚单位，并具有金属螯合作用，是NF－κB特异性阻断剂，可抑制其活性，具有多靶点高效的抗瘤作用。现将PDTC联合卡铂（carboplatin，CBP）对U251神经胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料 U251神经胶质瘤细胞，达氏修正依氏培养基（Dulbecco′s modified Eagle′s medium，DMEM），磷酸盐缓冲液（phosphate buffer solution，PBS），pH 7.2～7.4，10%胎牛血清（fetal bocine serum，FBS），四甲基偶氮唑蓝（3－［4，5－dimethylthiazol－2－yl］－2，5diphenyl tetrazolium bromide，MTT），台盼 蓝染色，膜联蛋白－V 型－异硫氰酸 荧光 素 （annexin－V－fluorescein isothiocyanate，annexin V－FITC）、碘化丙啶（propidium iodide，PI）双 染 色 试 剂 盒。PDTC，CBP，二 甲 基 亚 砜 （dimethyl sulfoxide，DMSO）。

1.2 方法

1.2.1 U251神经胶质瘤细胞培养与分组 U251神经胶质瘤细胞在100U／mL青霉素、100μg／mL链霉素和含有10%灭活FBS的高糖DMEM培养基中，置于37℃含5%CO2相对湿度95%的恒温培养箱内培养细胞贴壁生长，每1天换液1次，2～3d以1∶3传代1次，用0.125%胰蛋白酶消化传代培养。将PDTC和CBP用无菌蒸馏水调整为20μg／mL，4℃冰箱避光冷藏。将传代2次后的U251神经胶质瘤细胞随机分4组，对照组加常规培养液，实验A组加PDTC（0.1mg／mL）0.01mL，实验B组加 CBP（1mg／mL）0.01mL，实验 C组加PDTC（0.1mg／mL）0.01mL和CBP（1mg／mL）0.01mL，置于37℃、5%CO2、相对湿度95%的恒温培养箱内培养。

表1 4组不同时间U251神经胶质瘤细胞生长抑制率和凋亡率比较（±s，%）