邹新峰，郭爱珍＊，陈颖钰，胡长敏，王 冰，刘晓乐，谢 倩，姜 勇，张 策，陈焕春

（1.华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，湖北武汉430070；2.华中农业大学动物医学院，湖北武汉430070；3.华中农业大学动物科技学院，湖北武汉430070）

γ干扰素（interferon－γ，IFN－γ）是一种多功能生物活性多肽，具有抗感染、抗肿瘤活性和免疫调节等作用，如活化巨噬细胞、提高 MHCⅠ类和 MHCⅡ类分子的表达、促进抗原提呈等，在机体抗感染与免疫中发挥重要作用［1］。基于IFN－γ与感染之间的密切联系，医学及兽医学上常利用检测IFN－γ进行传染病诊断［2］。该方法灵敏度与特异性较高，显示出很大的应用前景［3－6］，其基本原理是曾经感染或发过病的人或动物，其T淋巴细胞被该病原如结核分支杆菌致敏，当在体外再次遇到相同抗原时，T淋巴细胞将在短时间内再激活产生大量IFN－γ，因此，通过检测特异性抗原刺激后T细胞分泌的IFN－γ水平即可判断动物是否感染过该病原。该原理在黄牛或人结核检测上得到应用，如人结核ELISPOT试剂盒、BOVIGAM®牛分支杆菌γ干扰素检测试剂盒等已有商品上市。但水牛尚无类似试剂盒可用。

据联合国粮农组织（FAO）统计，2009年全世界有水牛18 792万头，97%分布在亚洲（18 244万头），水牛数量位于前三位的国家是印度（10 663万头）、巴基斯坦（2 988万头）和中国（2 328万头）。水牛耐粗抗逆，是我国南方宝贵的品种资源，目前正由役、奶、肉兼用向肉或奶专用方向发展，且产业化程度不断提高，因此研发其新型疾病诊断技术具有重要意义。本研究通过克隆和真核表达水牛IFN－γ，制备单克隆抗体和多克隆抗体，建立灵敏度和特异性较高的水牛IFN－γ检测方法，为进一步研发水牛特异性疫病诊断技术奠定良好基础。……