陈 亮 张向东 马登飞 (安阳市人民医院神经内科，河南 安阳 455000)

脑血管病中脑出血约占20% ～30%，脑出血起病急骤、病情凶险、死亡率非常高，对脑出血的早期诊断和尽早治疗将会对患者的预后带来很大的改变〔1，2〕。血小板源性生长因子(PDGF)在中枢神经系统受到损伤时，合成和分泌会相应增加〔3，4〕，因此，本研究观察急性脑出血患者血清PDGF的动态变化，旨在为脑出血的早期诊断和病情以及预后判断提供相关生物学指标。

1 材料与方法

1.1 临床病例资料 2009年5月至2011年12月我院神经内科住院脑出血患者84例，入组者发病＜24 h，临床诊断参照脑血管病全国第四届学术会议所修订的标准:《各类脑血管病诊断要点》〔5〕，同时经头颅CT与MRI影像学检查确诊。其中男49例，女35例，年龄44～75〔平均(63.6±11.7)〕岁。脑出血患者在入院48 h内、第4、8天应用Fugl-Meyer评测法(FMA)对其进行神经功能缺损程度评分。排除标准:严重心脏、肝脏、肾脏等疾病，糖尿病以及甲状腺疾病，自身免疫性疾病、急慢性感染、血液病等。另选取我院体检中心的健康体检者26例为对照组，其中男15例，女11例，年龄40～72岁〔平均(59.3±12.5)〕岁，两组受试者年龄、性别和体重等具有可比性(P＞0.05)。

1.2 影像学检查 脑出血患者在入院第2天进行头颅影像学复查，并估算血肿大小，血肿体积=0.5×血肿最大长径×与长径相垂直的直径×血肿层面数，参照Leira等〔6〕的方法将血肿分为少量(体积＜20 ml)、中量(体积20～40 ml)、大量出血(体积＞40 ml)组。

1.3 PDGF的测定 受试者在发病 ＜48 h、第4、8、12天采集清晨空腹外周不抗凝静脉血5 ml，3 000 r/min离心15 min分离血清，-70℃低温保存待测。酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)测定外周血PDGF的表达水平，PDGF ELISA检测试剂盒购自北京尚柏生物工程公司，采用美国RB公司生产的试剂，严格按试剂盒说明操作，Model 550酶标仪(Bio-Rad，USA)450 nm处测定测定OD值，以OD值为纵坐标，以标准品浓度为横坐标，绘制标准曲线，然后对照标准曲线根据血清样品的OD值计算PDGF的浓度。

2 结果

2.1 脑出血患者血清PDGF表达水平随发病时间的动态变化脑出血患者＜48 h、第4、8、12天的血清PDGF含量均明显高于正常对照组(P＜0.01)，脑出血患者直到第8天血清PDGF水平仍未见差异性变化(P＞0.05)，12 d血清PDGF水平开始较前显著减少，与＜48 h、第4、8天相比具有显著性差异(P＜0.05)。见表1。

表1 脑出血患者发病不同时间血清PDGF表达的动态变化(μg/L，±s)

表1 脑出血患者发病不同时间血清PDGF表达的动态变化(μg/L，±s)

与对照组比较:1)P＜0.01;与发病＜48 h相比:2)P＜0.01;与发病第4天相比:3)P＜0.01;与发病第8天相比:4)P＜0.05

组别 n ＜48 h 第4天 第8天 第12天对照组26342.6±35.3 - - -脑出血组84 534.6±61.41)525.3±54.11)492.5±46.21)412.5±37.81)2)3)

2.2 脑出血患者血清PDGF蛋白含量与神经功能缺损的关系脑出血患者FAM评分在第8天开始升高，但其与＜48 h、第4天比较无显著性差异，第12天显著升高，与＜48 h、第4、8天比较存在统计学意义(P＜0.05)，说明患者病情出现好转时其相应的血清PDGF表达水平出现了减低，见表2。FAM评分与PDGF表达水平之间呈负相关(r=-0.62，P＜0.05)。

表2 脑出血患者血清PDGF水平动态变化与FMA评分之间的相关性(±s，n=84)

表2 脑出血患者血清PDGF水平动态变化与FMA评分之间的相关性(±s，n=84)

与发病＜48 h相比:1)P＜0.01;与发病第4天相比:2)P＜0.01;与发病第8天相比:3)P＜0.05

病程 PDGF(μg/L) FMA评分＜48 h 534.6±61.4 5.6±2.4第4天 525.3±54.1 5.8±2.7第8天 492.5±46.2 6.7±3.4第12天 412.5±37.81)2)3) 16.6±6.51)2)3)

2.3 不同出血体积脑出血患者血清PDGF表达水平的动态变化 脑出血＜48 h，不同出血体积PDGF表达水平均高于对照组(P＜0.01)，并且不同出血体积之间也存在显著性差异，随血肿体积的增大其水平也相应地升高(P＜0.05)，少量出血组PDGF水平第8天开始减低，第12天时恢复到正常水平(P＜0.05);中量出血组PDGF水平第8天也开始减低，但第12天仍然高于正常水平(P＜0.05);大量出血组PDGF水平在第12天才开始减低，高于正常水平(P＜0.05)。同一时间点不同分组PDGF表达水平之间也存在显著性差异(P＜0.05)。见表3。

表3 不同体积血肿患者血清PDGF表达水平动态变化的比较(±s，μg/L)

表3 不同体积血肿患者血清PDGF表达水平动态变化的比较(±s，μg/L)

与对照组比较:1)P＜0.05，2)P＜0.01;与发病＜48 h相比:3)P＜0.05，4)P＜0.01;与发病第4天相比:5)P＜0.05，6)P＜0.01;与发病第8天相比:7)P＜0.05

组别 n ＜48 h 第4天 第8天 第12天对照组26 342.6±35.3 - - -少量出血组 23 434.2±44.72) 427.3±41.42) 384.9±38.51)3)5) 352.3±32.64)6)7)中量出血组 32 514.6±63.72) 506.4±55.22) 466.5±50.62)3)5) 401.7±47.41)2)3)5)大量出血组 29 623.7±68.62) 602.0±61.72) 596.4±57.22) 511.7±43.82)3)5)7)

3 讨论

脑出血因其发病急、致死率、致残率高，即使入院病人也有30% ～40%的死亡率，并且50% ～70%的存活者遗留瘫痪、失语等严重残疾，因此脑出血成为难治性的脑血管疾病，尤其是出血后脑水肿常常会导致病情的恶化〔7，8〕。因此寻找一种非侵入性、快速准确诊断急性脑出血，并预测其损害程度及预后的生化检测指标，是完善临床诊治脑出血的有效途径。

在过去的几十年里，一些生物标记已经被用于一些疾病的早期诊断和病情的监控〔9〕，脑出血后会引起机体和脑组织局部的一系列病理生理反应并释放一些生物化学标志物，PDGF在中枢神经系统中有广泛的表达，与多种神经系统的疾病有密切关系，研究显示神经细胞损伤时神经胶质细胞合成PDGF增多〔10〕。脑出血所引起的脑水肿、脑缺血或缺氧、颅内压升高等因素导致了星形胶质细胞的大量增生和分泌，PDGF分子量较小只有28 kD，通过血脑屏障运输到血液中，另外脑出血续发的脑水肿所激发的炎症反应、受损的内皮细胞以及血液中血小板的激活，都会导致PDGF表达水平的升高〔11〕。

FAM评价法是一种综合躯体功能评价法，FAM评分越低，说明神经功能缺损的越严重，随着患者病情的好转FAM评分会逐渐升高〔12〕，本研究说明患者血清PDGF的表达水平与患者的病情密切相关。PDGF表达水平与患者的预后有一定的相关性。其可能的机制是脑出血量越大，压迫周围的脑组织越多使血肿周围水肿、炎症反应越强烈的，星形胶质细胞增生越活跃，各种机制促使PDGF合成分泌大量增加，所以PDGF表达水平也就反映出了患者病情的严重程度。

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3 Ma Q，Huang B，Khatibi N，et al.PDGFR-α inhibition preserves bloodbrain barrier after intracerebral hemorrhage〔J〕.Ann Neurol，2011;70(6):920-31.

4 Zhang ZW，Yanamoto H，Nagata I，et al.Platelet-derived growth factor-induced severe and chronic vasoconstriction of cerebral arteries:proposed growth factor explanation of cerebral vasospasm〔J〕.Neurosurgery，2010;66(4):728-35.

5 中华医学会全国第四届脑血管病学术会议.各类脑血管疾病诊断要点〔J〕.中华神经杂志，1996;29(6):379-82.

6 Leira R，Da'valos A，Silva Y，et al.Predictors and associated factors of early neurological deterioration in intracerebral hemorrhage〔J〕.Neurology，2004;63(3):461-7.

7 Brouwers HB，Goldstein JN.Therapeutic strategies in acute intracerebral hemorrhage〔J〕.Neurotherapeutics，2012;9(1):87-98.

8 Diedler J，Sykora M，Herweh C，et al.Intensive care management(corrected)of patients with intracerebral hemorrhage〔J〕.Nervenarzt，2011;82(4):431-8.

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10 Maeda Y，Hirano K，Hirano M，et al.Enhanced contractile response of the basilar artery to platelet-derived growth factor in subarachnoid hemorrhage〔J〕.Stroke，2009;40(2):591-6.

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