5-HT6受体在血管性痴呆大鼠海马中的表达变化
2013-09-13陈小东园园广州医科大学研究生院广东082
陈小东 李 园园 刘 雁 (广州医科大学研究生院,广东 广 州 5 082)
脑血管病,尤其是脑卒中后慢性脑缺血被认为是血管性痴呆(VD)的最常见病因,其病理生理机制涉及缺血后继发的脑能量代谢障碍、炎症因子的瀑布效应、氧化应激损伤、兴奋性氨基酸毒性作用、胆碱能神经元功能缺失等〔1〕。5-羟色胺(5-HT)受体家族在中枢神经系统认知、情感、摄食、昼夜周期等生理活动中具有调节作用〔2〕,其中,5-HT6受体几乎仅分布在中枢神经系统,尤其以纹状体、皮层、边缘系统等脑区的分布密度高,已被证实参与大脑学习、记忆、情感等高级智能和精神活动〔3〕。本文采用大鼠永久性双侧颈总动脉阻断模型,观察脑缺血后海马病理变化及CA1区5-HT6表达的改变,探讨该受体与VD发病的相关性。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 健康SPF级Wistar大鼠80只,购自南方医科大学动物实验中心,体重200~250 g,雌雄比例为1∶1,所有实验大鼠饲养于广州军区广州总医院动物中心,饲养房内温度(22 ±3)℃,湿度60%,5 只/笼,光/暗周期为12 h/12 h,实验期间自由获取水及标准颗粒饲料。
1.1.2 主要试剂 兔抗鼠5-HT6受体多克隆抗体购自Abcam公司,Envision二步法检测试剂盒购自Dako公司,二氨基联苯胺(DAB)试剂购自福州迈新生物公司,其余化学试剂均为分析纯级。
1.1.3 主要仪器 Morris大鼠水迷宫,SuperMaze动物行为学视频分析系统(上海欣软信息科技),日本Olympus BX-51显微镜,ImagePro plus病理图文分析系统。
1.2 方法
1.2.1 动物分组及模型制作 所有大鼠适应性饲养1 w后随机分成两组,VD组50只,假手术组(SO组)30只。动物术前禁食、禁水4 h,称重后以10%水合氯……
