刘维新，张绅，任益，桑立轩，顾寿智

（1.中国医科大学附属第一医院消化内科，沈阳 110001；2.聖隷クリストファー大学，浜松 4338558，日本）

恶性肿瘤是当今导致世界人类死亡的主要原因之一［1］，其中约1/4的患者其病因及发病机制与慢性炎症相关［2，3］。炎性肠病的年发病率约为2.2/10万［4］，而炎性肠病患者发生结直肠癌的风险较非炎性肠病者大大增加，患炎性肠病8～10年后结直肠癌的发病率每年以0.5%～1%递增，30年后高达18%［5］。尽管与炎性肠病相关的结直肠癌仅占全部结直肠癌的1%～2%，但却是造成炎性肠病患者死亡的主要原因［6］。溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是炎性肠病中常见的一个类型，反复发作的慢性炎症常进展为结直肠恶性肿瘤，而恶性肿瘤的发生和进展与其血管生成密切相关。新近研究表明，血管生成素（angiopoietin，Ang）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）及其受体 Flk-1以及直接或间接调控VEGF表达的缺氧诱导因子（hypoxia inducible factor，HIF）等均是参与调节恶性肿瘤血管生成的重要因素［7］。葡聚糖硫酸钠（dioctyl sodium sulfosuccinate，DSS）多循环饮用可诱导小鼠发生与人类临床和病理相似的UC［8］，1，2-二甲肼（DMH）/DSS联合法可诱导小鼠发生UC相关性结直肠癌 （ulcerative colitis-associated colorectal cancer，UCACRC），可成功模拟炎性肠病诱发结直肠癌的全过程［9］。本文利用以上2种方法建立UC及UCACRC 小鼠模型，检测 Ang-2、VEGF、Flk-1、HIF在UC组织、UCACRC组织及正常结肠组织中的表达水平，探讨其与血管生成的关系。

1 材料与方法

1.1 实验动物

选用雄性5～6周龄Balb/c小鼠66只，体质量在25～32 g之间，由中国医科大学医学实验动物中心提供。适应性喂养1周，恒温（23±2）℃，恒湿50%±10%，昼夜循环。

1.2 主要试剂

1.2.1 造模试剂：分子量为5 000的DSS，购自Sigma公司；DHM，购自Sigma公司。

1.2.2 免疫组化法试剂：鼠抗鼠VEGF单克隆抗体、兔抗鼠Flk-1多克隆抗体、S-P免疫组化通用型试剂盒和DAB显色剂，购自北京中山生物试剂公司；……