不同碱裂解法快速提取甜菜大群体DNA的研究

2013-09-03吴则东王华忠倪洪涛

中国糖料 2013年3期

吴则东，王华忠，倪洪涛

（1.黑龙江省普通高等学校甜菜遗传育种重点实验室/黑龙江大学，哈尔滨150080；2.中国农业科学院甜菜研究所/黑龙江大学农作物研究院，哈尔滨150080；3.中国农业科学院北方糖料作物资源与利用重点开放实验室，哈尔滨150080；4.黑龙江大学资源与环境学院，哈尔滨 150080）

近些年来，分子生物学发展较快，分子生物学技术也已经广泛地应用到作物的多个领域，例如种子纯度的鉴定[1]、构建指纹图谱[2－3]、遗传多样性分析[4]、遗传图谱的构建[5－6]以及植物数量性状位点的定位[5]等等，但这一切都有赖于植物基因组DNA的提取。从目前的发展来看，植物基因组DNA的提取主要有SDS法和CTAB法，虽然还有一些试剂盒可以直接用于植物DNA的提取，但是这些方法一般都是步骤较多，要用到很多药品，提取过程相对复杂，而且还要用到一些有毒的试剂。而甜菜作为世界两大糖料作物之一，这些年来分子生物学方面也得到了很大的发展，目前文献报道的甜菜基因组DNA提取主要是利用SDS以及CTAB对甜菜叶片进行提取，而利用碱裂解法对甜菜大群体进行基因组DNA的提取还没有相关的报道，目前见诸文献应用此种方法提取基因组DNA主要是玉米[7-10]、高粱[11]、水稻[12]等作物。本实验尝试利用NaOH对甜菜干种子进行DNA的提取，旨在建立一种快速提取甜菜大群体DNA的方法，为将来快速鉴定甜菜品种纯度以及真实性打下基础。