张保平，钟 婷，张 莉，况海斌

(南昌大学医学院生理学教研室，江西南昌330006)

胚胎的正常发育依赖于功能性胎盘的形成，在胎盘发育的过程中，滋养层细胞的生长与侵袭受机体严格的时空性调节［1］。在妊娠早期，如滋养层细胞生长发育差，侵入不足，将导致早期流产、先兆子痫以及胎儿宫内发育迟缓等疾病［2］;如增生过度、侵入失控，正常滋养层细胞将转化为绒毛膜上皮癌［3］，而有关其具体的调节过程不详。

细胞周期末期促进复合物(anaphase promoting complex，APC)与其调节亚基Fzr1是泛素蛋白酶小体系统中的一种细胞内泛素连接酶E3，在增殖细胞中通过泛素化，降解特定的底物蛋白调控细胞周期的作用［4］。最近有研究显示，Fzr1基因敲除后，在妊娠9.5～10.5 d产生胚胎死亡，胎盘出现发育障碍［5－6］。另外，还表现为神经系统的干细胞增殖增强，自发性肿瘤(如乳腺瘤，脂肪腺瘤，睾丸癌，纤维腺瘤，肺癌等)的发生率明显增加［5－6］。这些均提示，Fzr1基因与胎盘发育相关，然而有关其在胎盘发育过程中时空性表达变化及其对滋养层细胞增生和侵袭的影响未见相关的报道。本研究拟探讨Fzr1对JAR滋养层细胞增殖和侵袭的影响。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

FD培养基(Hyclone公司)，Matrigel(BD公司)，兔抗 Fzr1抗体(Invitrogen公司)，抗 Actin抗体、Fzr1 siRNA(sc-44349)、siRNA Transfection Reagent(sc-29528)及Control siRNA(sc-36869)(SANTA CRUZ公司)，HRP标记的二抗(中杉生物公司)。

1.2 妊娠早期和晚期胎盘标本

人妊娠早期(6～9周)绒毛样本(共20例)，取自正常妊娠的真空负压抽吸人工流产材料，妊娠晚期胎盘取自妊娠足月(34～38周)胎盘(共15例)。标本取出后，立即送实验室，用0.1 mol/L磷酸盐缓冲液清洗，一部分材料固定于Bouin's氏液中，用于免疫组化。……