张 睿

遵义医学院医学与生物学研究中心，贵州 遵义 563099

药用真菌是一类具有药用价值的真菌，即在菌丝体、子实体、菌核或孢子中能产生诸如氨基酸、蛋白质多糖、苷类、生物碱、黄酮类及萜类等多种物质，对疾病有预防、抑制或治疗作用[1]。我国地域辽阔，自然条件和生态环境十分复杂，造成了药用真菌种类的多样性，据不完全统计，我国的药用真菌大约500种，其中大型药用真菌约有300多种，但已开发的大型药用真菌只有20至30种[2]。药理研究也集中在降血脂、抗肿瘤、调节机体免疫力、调节新陈代谢等方面[3]，在诸多活性中，抗肿瘤活性最引人关注，且抗肿瘤活性成分主要为多糖、萜类物质、蛋白及生物碱等[4]。研究以斑褐孔菌、裂蹄木层孔菌、苦白蹄、木蹄层孔菌为研究对象，对其石油醚提取物的体外抗肿瘤活性进行初步研究，以期为这四种大型真菌的开发利用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

斑褐孔菌 (Fuscoporia punctata)、裂蹄木层孔菌(Phellinus rimosus)、苦白蹄 (Fomitopsis officinalis)、木蹄层孔菌 (Pyropolyporus fomentarius)，采自吉林省敦化市。人肺腺癌细胞A－549由遵义医学院医学与生物学研究中心提供。RPMI－1640培养基、胎牛血清，美国Gibco公司;胰蛋白酶、青霉素、链霉素、Tris碱，美国Amresco公司;磺酰罗丹明、DMSO，美国Sigma公司;其余试剂均为分析纯。

R－210型旋转蒸发仪，瑞士Buchi公司;3131型CO2培养箱、台式离心机、全波长酶标仪，美国Thermo公司;单人超净工作台，苏州安泰空气技术有限公司;Ti－S倒置相差显微镜，日本Nikon公司。

1.2 实验方法

1.2.1 石油醚提取物的制备 真菌子实体60℃烘干、粉碎、称取粉末100g，加1L石油醚60℃连续回流提取两次，每次3h。……