陈建伟，刘 玲，钟 玲

（重庆医科大学附属第二医院肾内科 400010）

糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是2型糖尿病严重的常见微血管并发症，是最终导致终末期肾衰竭的常见原因，也是糖尿病致死的主要原因之一，由于其发病率高，治疗棘手、效果差，危害大而备受关注。而近年来研究发现nephrin基因在足突细胞上的表达下调在肾功能不断恶化中起到重要作用［1］。因此，如何抑制nephrin基因在足突细胞上的下调，在DN的治疗中起到至关重要的作用，目前为止很多临床对照研究显示，大黄酸在控制DN蛋白尿及DN进展中有一定作用，然而，其除了对血糖、胰岛素抵抗、减轻肾脏肥大等作用之外［2－3］，是否能够抑制nephrin基因下调，目前尚无实验研究。本实验旨在探索大黄酸对DN的治疗作用，以及通过nephrin基因在DN大鼠足突细胞的表达变化，探讨大黄酸治疗DN的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 Wistar雄性大鼠18只，体质量170～200g（重庆医科大学中心实验室）；链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）［3－4］。

1.2 试剂 24h尿蛋白测定试剂盒（北京为康惠华生物公司）；酶联免疫吸附测试大鼠尿微量清蛋白试剂盒（上海研谨生物科技有限公司）；抗体稀释液（ADI公司）；兔抗nephrin抗体。

1.3 实验药物 大黄酸是从大黄的根茎中提取［5－6］，大黄根茎购自北京兴事堂，并由上海众华生物科技有限公司提取。

1.4 仪器 德国Satorious电子天平；日立7020生物分析仪。

1.5 方法

1.5.1 动物模型制作 按照Anderson等［1］建立方法将所有动物适应性喂养5d，禁食12h，STZ以0.1mmol／L柠檬酸缓冲液溶解，按照50mg／kg一次性腹腔注射作为DN模型，模型对照组给予同等剂量的柠檬酸缓冲液，72h后开始检测空腹血糖、尿糖、尿量及24h微量清蛋白排泄率，DN建立成功标准为：（1）空腹血糖高于16.6mmol／L；……